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文檔簡介
1、靜脈血栓栓塞癥(venous thromboembolism,VTE)是一種環(huán)境和/或遺傳因素參與的常見病、多發(fā)病。近年,有學(xué)者提出炎癥免疫反應(yīng)在VTE的發(fā)病機制中可能發(fā)揮重要作用。吞噬細胞及NK細胞作為重要的非特異性免疫細胞及炎癥因子的效應(yīng)細胞,其在炎癥及免疫調(diào)節(jié)中的作用逐漸引起研究者的興趣。
目的:應(yīng)用人類全基因組表達譜芯片技術(shù)檢測吞噬細胞及NK細胞相關(guān)基因mRNA在PTE中的表達水平,探討兩者在PTE中可能的作用。<
2、br> 方法:隨機收集20例PTE患者及20例性別、年齡與之匹配的對照者,抽取外周血單個核細胞總RNA,合成Cy3標記的PTE組和對照組的cRNA探針,與Agilent人類全基因組oligo芯片雜交。雜交后進行圖像掃描,并使用GeneSpringGX數(shù)據(jù)分析軟件對基因芯片原始信號值進行熒光、背景、標準化參數(shù)設(shè)定及穩(wěn)健多芯片平均標準化分析處理。將PTE組與對照組標準化基因信號強度采用兩類樣本比較隨機方差參數(shù)T檢驗,篩選吞噬細胞及NK
3、細胞相關(guān)基因mRNA表達信息,顯著差異基因篩選標準為p<0.05。采用FQ-PCR對部分基因的芯片檢測結(jié)果進行檢測以驗證基因芯片的可靠性。
結(jié)果:檢測出吞噬細胞相關(guān)基因mRNA表達條帶8條(CD11a、CD14、CD16b、CD32a、CD32b、CD35、MRC2、SCRAB1),且PTE組mRNA表達均高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。檢測出NK細胞相關(guān)基因mRNA片段18條:與對照組相比,PTE組殺傷細胞
4、凝集素樣受體(KLR)、殺傷細胞免疫球蛋白樣受體(KIR)及自然細胞毒受體(NCR)mRNA表達呈下調(diào)趨勢,KIRmRNA表達差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);KLR中KLRC2、KLRC4mRNA表達呈下調(diào)趨勢,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);KLRB1、KLRC1、KLRC3、KLRD1、KLRF1、KLRG1、KLRK1mRNA表達下調(diào),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);NCR中NCR1mRNA表達顯著下調(diào)(P<0.01),N
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