妊娠甲亢大鼠甲狀腺功能及肝臟凋亡蛋白表達的影響.pdf

1、目的：甲狀腺功能亢進癥(hyperthyroidism)簡稱甲亢，是指甲狀腺腺體本身產(chǎn)生甲狀腺激素過多而引起的甲狀腺毒癥，表現(xiàn)為高代謝癥候群，對精神神經(jīng)系統(tǒng)，心血管系統(tǒng)，消化系統(tǒng)，骨骼肌肉和生殖系統(tǒng)均有不同程度的影響。甲狀腺功能亢進癥在妊娠期的發(fā)病率是0.1-0.2%。甲狀腺激素(T4)可以透過胎盤進入胎兒血液循環(huán)系統(tǒng)。妊娠期甲亢對母體和后代均有影響，可能導(dǎo)致宮內(nèi)生長受限，早產(chǎn)，死產(chǎn)，新生兒甲亢或甲減等。國內(nèi)外研究表明，甲狀腺功能亢進時

2、，促凋亡蛋白(caspase-3)表達增多而抗凋亡蛋白(Bcl-2)表達下調(diào)引起肝臟的細胞凋亡作用增加。本研究主要探討母體不同程度甲亢對子代不同生長發(fā)育期甲狀腺功能的影響，以及子代的肝臟凋亡蛋白的表達。
　　方法：將雌性SD大鼠隨機分為正常對照組(N組)，輕度甲亢組(A組)，重度甲亢組(B組)。通過給予不同劑量左甲狀腺素鈉連續(xù)灌胃方法，制作大鼠甲狀腺功能亢進模型。模型成功后各組雌性大鼠以2:1比例與雄性SD大鼠合籠，A組B組雌鼠受

3、孕后繼續(xù)給予左甲狀腺素鈉灌胃，N組雌鼠給予同等量生理鹽水。觀察每組母鼠及所生雄性仔鼠一般情況。測定仔鼠21天和60天甲狀腺功能，觀察其0天，21天，60天肝臟組織HE染色組織病理結(jié)構(gòu)并應(yīng)用western blotting技術(shù)檢測各組仔鼠各時期肝臟組織凋亡蛋白caspase-3和Bcl-2的表達。
　　結(jié)果：
　　1.母鼠的一般情況：正常對照組大鼠進食飲水量，日常活動精神狀態(tài)均正常。輕度甲亢組大鼠進食飲水量較正常組稍增加，日常

4、精神狀態(tài)較正常對照組稍興奮。重度甲亢組大鼠進食飲水量較正常對照組明顯增加，日常精神狀態(tài)較正常對照組亢奮，易激惹，呈現(xiàn)出明顯的高代謝癥候群。
　　2.母鼠甲狀腺功能測定：隨著甲亢癥狀的加重，F(xiàn)T3、FT4逐漸增高，TSH逐漸降低。輕度甲亢組與重度甲亢組FT3、FT4均較正常對照組顯著升高(P<0.01)，且重度甲亢組FT3、FT4較輕度甲亢組顯著升高(P<0.01)；輕度甲亢組與重度甲亢組TSH均較正常對照組顯著降低(P<0.01)

5、，且重度甲亢組TSH較輕度甲亢組降低(P<0.01)。
　　3.子代大鼠的一般情況：正常對照組仔鼠生長發(fā)育良好，逐漸長出絨毛，絨毛色澤好，輕度甲亢組和重度甲亢組仔鼠生后較正常對照組體重減少，絨毛生長緩慢，無光澤，且重度甲亢組仔鼠此種表現(xiàn)更為明顯。
　　4.子代大鼠甲狀腺功能測定：21天時輕度甲亢組和重度甲亢組FT3、FT4較正常對照組增高(P<0.01)，TSH較正常對照組減低(P<0.01)。21天時重度甲亢組FT3、FT

6、4較輕度甲亢組增高(P<0.01)，TSH較輕度甲亢組減低(P<0.01)。60天時輕度甲亢組FT3、FT4較正常對照組呈現(xiàn)增高趨勢，TSH較正常對照組呈現(xiàn)減低趨勢，但無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。60天時重度甲亢組FT3、FT4較正常對照組增高(P<0.05)，TSH較正常對照組減低(P<0.05)。60天時重度甲亢組FT3、FT4較輕度甲亢組增高(P<0.05)，TSH較輕度甲亢組減低(P<0.05)。輕度甲亢組60天FT3、FT4

7、較21天時升高，無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，TSH較21天時升高(P<0.01)。重度甲亢組60天FT3、FT4較21天時減低，無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，TSH較21天時升高(P<0.01)。
　　5.甲亢子代大鼠肝臟組織病理學(xué)改變：正常對照組子代大鼠肝臟組織細胞排列整齊。輕度甲亢組和重度甲亢組子代大鼠的肝臟組織肝小葉無序混亂和局部肝細胞壞死，脂肪侵潤，細胞質(zhì)液泡化，細胞核不規(guī)則和肝細胞色素沉著。隨著甲亢程度的增加，這種表現(xiàn)

8、也愈加明顯。
　　6.甲亢子代大鼠肝臟組織凋亡蛋白的表達：
　　輕度甲亢組和重度甲亢組21天的caspase-3蛋白的表達較正常對照組上調(diào)(P<0.01)，輕度甲亢組60天的caspase-3蛋白的表達與正常對照組相比無統(tǒng)計學(xué)意義上的差別(P>0.05)，重度甲亢組60天的caspase-3蛋白的表達較正常對照組明顯上調(diào)(P<0.01)。且各組仔鼠21天和60天的caspase-3蛋白的灰度值結(jié)果符合球?qū)ΨQ分布，分組因素與時

9、間因素具有交互作用(P<0.01)，時間因素的作用差別具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　輕度甲亢組和重度甲亢組21天的Bcl-2蛋白的表達較正常對照組下調(diào)(P<0.01)，輕度甲亢組60天的Bcl-2蛋白的表達與正常對照組相比無統(tǒng)計學(xué)意義上的差別(P>0.05)，重度甲亢組60天的Bcl-2蛋白的表達較正常對照組明顯下調(diào)(P<0.01)，且各組仔鼠Bcl-2蛋白的灰度值結(jié)果符合球?qū)ΨQ分布，分組因素與時間因素具有交互作用(P<0

10、.01)，時間因素的作用差別具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。
　　7.相關(guān)性分析
　　仔鼠肝臟caspase-3蛋白的表達與仔鼠FT3、FT4有正相關(guān)的趨勢，與TSH有負相關(guān)的趨勢，但是無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，與母鼠FT3呈正相關(guān)(P<0.01)。仔鼠肝臟Bcl-2蛋白的表達與仔鼠TSH成正相關(guān)(P<0.05)，與仔鼠FT3、FT4有負相關(guān)的趨勢，但是無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，與母鼠TSH成正相關(guān)(P<0.05)。