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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:本研究通過(guò)建立大鼠低蛋白高碘動(dòng)物模型,研究低蛋白高碘對(duì)大鼠生長(zhǎng)、代謝及甲狀腺功能的影響,探討其可能的致病機(jī)理。
方法:選用斷乳后1個(gè)月左右,體重100-120g遠(yuǎn)交封閉群的wistar大鼠,根據(jù)體重和性別隨機(jī)分為8組,次序?yàn)?①正常對(duì)照組(NI):正常飼料+正常水組;②正常飼料+10倍碘組(10HI);③正常飼料+50倍碘組(50HI);④正常飼料+100倍碘組(100HI);⑤低蛋白對(duì)照組(LC):低蛋白+正常水組
2、。⑥低蛋白飼料+10倍碘組(L10HI);⑦低蛋白飼料+50倍碘組(L50HI);⑧低蛋白飼料+100倍碘組(L100HI),每組24只。每周稱(chēng)體重、記錄飲水及飼料消耗等情況,并分別于實(shí)驗(yàn)2、4和6個(gè)月時(shí)收集尿液,凍存。分別在喂養(yǎng)2、4、6個(gè)月后每組取8只大鼠,拔眼球取血離心保留血清,處死取甲狀腺。分別檢測(cè):尿碘,血清碘濃度,血清總T4(TT4)、總T3(TT3)、游離T3(FT3)、游離T4(FT4)、TSH水平,抗氧化指標(biāo)(超氧化物
3、歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)),并觀察喂養(yǎng)6個(gè)月后在光、電鏡下甲狀腺形態(tài)結(jié)構(gòu)改變,TUNEL(末端標(biāo)記法)檢測(cè)甲狀腺細(xì)胞凋亡。數(shù)據(jù)采用SPSS16.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
結(jié)果:
1.研究結(jié)果表明,各組大鼠每天飲水量及飼料消耗量沒(méi)有明顯差異(P>0.05);低蛋白高碘組大鼠體重明顯低于對(duì)照組(P<0.01或P<0.05);飲水中碘濃度相同的條件下,低蛋白飼料+高碘飲水各組
4、與正常飼料+高碘飲水各組相比,尿碘值均明顯增高(均為P<0.01)。碘濃度相同的條件下,低蛋白飼料+高碘飲水各組與正常飼料+高碘飲水各組相比,血碘值均明顯降低(均為P<0.01)。
2.血清甲狀腺素測(cè)定結(jié)果表明,兩個(gè)月時(shí),L100HI組大鼠血清FT4水平明顯高于100HI組(P<0.05);四個(gè)月時(shí),低蛋白高碘各組大鼠血清TT4、FT4水平明顯高于對(duì)應(yīng)濃度的單純高碘組(P<0.01);低蛋白高碘各組大鼠血清TSH水平明顯低
5、于對(duì)應(yīng)濃度的單純高碘組(P<0.01);六個(gè)月時(shí),低蛋白高碘各組大鼠血清TT4、FT4、TT3、FT3水平明顯低于對(duì)應(yīng)濃度的單純高碘組(P<0.05或P<0.01);L10HI、L50HI組血清TSH水平分別明顯高于10HI、50HI組(P<0.01)。
3.血清抗氧化指標(biāo)測(cè)定結(jié)果表明,2個(gè)月時(shí),L100HI組GSH-Px活力明顯低于100HI組(P<0.05);4個(gè)月時(shí),L100HI組GSH-Px活力、SOD活力明顯低于
6、100HI組(P<0.05),L100HI組MDA含量明顯高于100HI組(P<0.05);6個(gè)月時(shí),L100HI、L50HI組GSH-Px活力分別明顯低于對(duì)應(yīng)的100HI、50HI組(P<0.05或P<0.01),L100HI、L50HI組MDA含量分別明顯高于對(duì)應(yīng)的100HI、50HI組(P<0.05)。
4.甲狀腺相對(duì)重量及病理學(xué)觀察結(jié)果表明,低蛋白高碘組大鼠甲狀腺相對(duì)重量明顯增大,光鏡結(jié)果顯示,低蛋白高碘組甲狀腺濾
7、泡多明顯增大,上皮細(xì)胞扁平狀,濾泡腔內(nèi)充滿豐富濃染的膠質(zhì)。電鏡觀察結(jié)果顯示,低蛋白高碘組甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞核變扁平,細(xì)胞內(nèi)膠質(zhì)小泡明顯增多,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)線粒體空泡樣變,還可見(jiàn)凋亡細(xì)胞,染色質(zhì)濃縮、集邊,有的凋亡細(xì)胞發(fā)生染色質(zhì)濃縮、核膜不完整、核碎裂。
5.TUNEL法檢測(cè)甲狀腺細(xì)胞凋亡結(jié)果表明,低蛋白高碘組可觀察到大量不規(guī)則散在分布的凋亡細(xì)胞,細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯增高(P<0.05或.P<0.01)。
結(jié)論:
8、 本研究通過(guò)給與Wistar大鼠低蛋白高碘飲食6個(gè)月建立低蛋白高碘動(dòng)物模型,研究結(jié)果表明:
1.大鼠對(duì)單純高碘及單純低蛋白飲食具有較強(qiáng)耐受性;與同水碘濃度的單純高碘組相比,低蛋白高碘組大鼠體格發(fā)育遲滯,碘代謝異常(尿碘偏高、血碘偏低)。
2.與同水碘濃度的單純高碘組相比,低蛋白高碘組大鼠血清甲狀腺素水平異常,短期內(nèi)血清TT4、FT4水平明顯偏高,提示甲亢危險(xiǎn)性增高;長(zhǎng)期作用下血清TT4、FT4、TT3、F
9、T3水平偏低,出現(xiàn)甲低癥狀。低蛋白因素可加重高碘對(duì)甲狀腺功能的不良影響。
3.與同水碘濃度的單純高碘組相比,低蛋白高碘(>50倍正常需要量)組大鼠甲狀腺抗氧化酶活性降低,脂質(zhì)過(guò)氧化物含量升高,大鼠血清抗氧化系統(tǒng)受到明顯影響,機(jī)體出現(xiàn)過(guò)氧化損傷。
4.與同水碘濃度的單純高碘組相比,低蛋白高碘(≥50倍正常需要量)組大鼠甲狀腺相對(duì)重量偏大,甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)異常,凋亡細(xì)胞增多。
總之,低蛋白高碘
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