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1、Absidiasp.R菌是從酒曲中分離得到的一種霉菌,該菌在適宜條件下能夠產(chǎn)生高活性的大豆異黃酮糖苷水解酶。本文圍繞大豆異黃酮糖苷水解酶的分離純化以及理化性質(zhì)等展開系列研究。大豆異黃酮糖苷水解酶經(jīng)硫酸銨分級沉淀、DEAE-Cellocuse(DE-52)離子交換凝膠層析對發(fā)酵液進行了分離和純化,并得到了電泳純的酶。該酶被純化了11倍,收率為10.9﹪;該酶的最適反應(yīng)溫度為50℃;最適pH為5.0;溫度在60℃以下、pH為5.0-7.0范
2、圍內(nèi)該酶較穩(wěn)定,超過此范圍,酶活力明顯降低;Co2+對該酶有激活作用;Ag+、Cu2+對該酶有抑制作用;經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳測得該酶的分子量為53kD。等電聚焦電泳測得大豆異黃酮糖苷水解酶等電點為3.2;以染料木甙為底物,pH為5.0,反應(yīng)溫度為50℃時的米氏常數(shù)(Km)為12.89mmol/L。該酶在水解底物的特性上不同于傳統(tǒng)的β-葡萄糖苷酶(EC3.2.1.21),用大豆異黃酮糖苷酶將提取的大豆異黃酮進行酶解,得到游離型的苷
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