大豆異黃酮糖苷水解酶的分離純化及性質(zhì)研究.pdf_第1頁(yè)
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1、Absidiasp.R菌是從酒曲中分離得到的一種霉菌，該菌在適宜條件下能夠產(chǎn)生高活性的大豆異黃酮糖苷水解酶。本文圍繞大豆異黃酮糖苷水解酶的分離純化以及理化性質(zhì)等展開(kāi)系列研究。大豆異黃酮糖苷水解酶經(jīng)硫酸銨分級(jí)沉淀、DEAE-Cellocuse(DE-52)離子交換凝膠層析對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行了分離和純化，并得到了電泳純的酶。該酶被純化了11倍，收率為10.9﹪；該酶的最適反應(yīng)溫度為50℃；最適pH為5.0；溫度在60℃以下、pH為5.0-7.0范

2、圍內(nèi)該酶較穩(wěn)定，超過(guò)此范圍，酶活力明顯降低；Co2+對(duì)該酶有激活作用；Ag+、Cu2+對(duì)該酶有抑制作用；經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳測(cè)得該酶的分子量為53kD。等電聚焦電泳測(cè)得大豆異黃酮糖苷水解酶等電點(diǎn)為3.2；以染料木甙為底物，pH為5.0，反應(yīng)溫度為50℃時(shí)的米氏常數(shù)(Km)為12.89mmol/L。該酶在水解底物的特性上不同于傳統(tǒng)的β-葡萄糖苷酶(EC3.2.1.21)，用大豆異黃酮糖苷酶將提取的大豆異黃酮進(jìn)行酶解，得到游離型的苷

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