三種糖類和抗氧化劑對(duì)豬精子冷凍保存效果的研究.pdf

1、三種糖類和抗氧化劑對(duì)豬精子冷凍保存效果的研究摘 要由于 豬精子冷凍后的低成活率和人工授精后的低繁殖率， 使得豬精液冷凍保存技術(shù)難以 得到 推廣， 為了 進(jìn)一步提高 冷凍解凍后豬精液的 質(zhì)量， 保護(hù)精子抵抗低溫打擊的能力。 本試 驗(yàn)以 紅 景 天多 糖、 拘祀多 糖、 海藻搪作為 冷凍保護(hù)劑; 以 半膚 氨酸、 谷 膚甘 肚、亞牛 磺酸 作為抗氧化劑，以 冷凍解凍 后精子的活力、 活率、 線粒體活性、 質(zhì)膜完整率和頂體完 整 率作 為 評(píng)

2、價(jià)指 標(biāo)， 利 用碘化 丙 綻 ( P l) 、羅 丹明1 2 3 、 低 滲 腫 脹試驗(yàn) ( H O S T )和異 硫氰酸熒光素連接的花生凝集素 ( P J T GP N A ) 分別檢測(cè)了 精子的活力、 線粒體活性、 質(zhì)膜完整率和頂體完整率. 同時(shí) 研究了 解凍方法， 冷凍劑 型對(duì)冷凍解凍后活率的 影響并 對(duì)冷 凍解凍后精子的D N A損傷狀況作了 初步探討， 得到如下結(jié)果。1 . 在 豬的 精液冷凍過(guò)程中， 在傳統(tǒng)的稀釋液T C

3、 G基礎(chǔ)上， 添加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為6 % 的 紅景天多搪， 6 % 一8 % 的拘祀多搪， 4 % 的 海藻搪均可提高 豬精子凍后活力、 活率、 質(zhì)膜完整率， 頂體完整率，都顯著好于對(duì)照組 ( P 海藻 糖> 構(gòu)祀多 搪。2 . 采用不同 解凍方法解凍， 雖然各組之間活力表現(xiàn)差異顯著， 5 0℃ 水浴1 2 5解凍精子活力最高( 4 1. 5 6 %) ， 但是從3 7℃孵育的結(jié)果來(lái)看， 以3 7℃ 水浴4 5的解凍效果最佳。3 . 分

4、 別采用0 2 5 m l 和 0 . s m l 細(xì)管冷凍， 解凍后兩者活率比 較差異不顯著( P> 0 . 0 5 ) ，但 0 ， 2 5 m l ( 3 7 . 9 7 %) 細(xì)管冷凍效果優(yōu)于0 ， s m l ( 3 7 . 2 0 % )細(xì)管.4 . 添加sn 1 M半朧氨酸獲得最高 凍后活率 ( 4 0. 2 0 %) 、 質(zhì)膜完 整率 ( 45 . 0 1%) 和頂體完整率 ( 6 43 5 %) ， 但與添加Z

5、j m M組凍后活率 ( 4 0. 1 5 % ) 、 質(zhì)膜完整率 ( 4. 2%)和頂體完整率 ( 6 2一 4 1%)比 較差異不顯著 ( P> 住 0 5 ) 。 與其他各添加組及對(duì)照組比 較均表現(xiàn)為 差 異 顯著 ( P0 . 0 5 )， 但添加l m M亞牛磺酸凍后精子質(zhì)膜完整率 ( 43 . 1 0 % ) 和頂體完整率 ( 56 . 9 0% ) 與其他各組比 較均表現(xiàn)為差異顯著 ( P <。 刀 5 ) .

6、7 . 冷凍會(huì)造成豬精子 D NA 的損傷， 添加體積分?jǐn)?shù)為2 ~ 3 % 的 甘油可顯著降 低 D 隊(duì) 損傷的比例。8 . 添加 2 . 5 一s n 1 M 半膚氨酸，I n 讓 以的谷膚甘膚和亞?；撬峥娠@ 著降低冷凍對(duì)豬精子造成的D N A損傷。關(guān)鍵詞: 豬精液; 冷凍保存; 冷凍保護(hù)劑; 抗氧化劑: D N A 損 傷l mM.6 T he r a te s o f m e n mb r a ne i n t e 幼t y a

7、nd 魷 r o s o m e i n t r e g r i t y i nl m Mh y p o t a u n n e 腳u p w e r e5 1 即i f i c a n t l y d i f l 七 r e n t f r omt h o s e i n o t h e rg r ou P s . B u t t h e r a t e s o f v i a b i l i t y i n g r o 叩s a d

8、 d i n gh 即 o t a u r i n e w e r e n o t s i g ” l f i c a n t l y d i f er e n t f r omt h a t c o n t r o ] g r o u P·7 T h e d a ma g e o f 印 e r m D N Ac o u l db e c a u s e d b yf r oz e n 一 t h a we d ·

9、 I t . 1 0 w e r s t h e r a t e o fd a n l a g e w h e na dd i n g Z 一 3 %g l y ce r olS T h e d a ma g e r a te so f f r oz e n一 t h a we d S P 和 D N Aw e r e1 o w e r e d s i g ni f i c a n t l y w he na dd i n g2 5 ~

10、s m Mc 擠 t e i n e ， l m Mg l u 怕 t h i o n e 即 d l m Mh y p 0 1 a l l n n e 伊 < 口 . 盯少.K e y w o r d s : B o a rs e me n: C r y o P r e s e r v a t i o n ;C r y o P r o t e c t o r ;A n t i o x i d a n t : D N Ad a m