日本七鰓鰻CD9分子的基因克隆、表達以及免疫學活性研究.pdf

1、CD9分子是四次跨膜蛋白超家族的成員,目前研究證明,該分子在細胞粘附和機體免疫應答中發(fā)揮著重要的作用。作為無頜類脊椎動物的代表之一,日本七鰓鰻因其獨特的進化地位而受到人們關(guān)注,成為脊椎動物免疫系統(tǒng)起源與進化研究的新型模式生物。目前在七鰓鰻體內(nèi),發(fā)現(xiàn)有多種與脊椎動物免疫反應以及細胞的分化、增殖、遷移和信號轉(zhuǎn)導相關(guān)的同源基因的表達,這些基因的發(fā)現(xiàn)對于揭示早期適應性免疫系統(tǒng)的起源具有重要意義。雖然有這么多相關(guān)基因的發(fā)現(xiàn),但是對于日本七鰓鰻而言

2、,其CD9分子的免疫相關(guān)功能尚不明確。在本篇論文中,作者通過檢索日本七鰓鰻白細胞cDNA文庫,篩選CD9分子的EST序列,通過基因克隆得到了CD9基因的編碼區(qū)序列。日本七鰓鰻CD9基因的開放閱讀框長684 bp,編碼228個氨基酸,通過序列比對表明,它與其它物種中CD9基因具有較高的同源性。Real-time PCR以及免疫組化結(jié)果顯示,CD9基因在日本七鰓鰻組織中分布廣泛,在心臟中的豐度最高,在肝臟,鰓,腎等組織中也有不同程度的表達。

3、使用LPS免疫七鰓鰻后,其肝臟和心臟中CD9的mRNA表達水平呈顯著上調(diào)趨勢,這表明CD9在這些組織中發(fā)揮著免疫調(diào)控的作用。免疫共沉淀的結(jié)果顯示,日本七鰓鰻CD9和CD29可以在腸里發(fā)生相互作用。流式細胞術(shù)結(jié)果顯示,CD9分子表達于日本七鰓鰻白細胞,并且在粒細胞中的表達水平要高于淋巴細胞,這預示著CD9分子可能在日本七鰓鰻的固有免疫應答中發(fā)揮著更多的功能。本文研究結(jié)果表明,日本七鰓鰻CD9在各個組織中有著較為廣泛的分布并且在七鰓鰻的免疫