固定化酶酶促轉(zhuǎn)化生產(chǎn)L-酒石酸及鹽.pdf

1、順式環(huán)氧琥珀酸水解酶是一種環(huán)氧化合物水解酶(Epoxide Hydrolases),能選擇性地將水分子加到環(huán)氧底物上生成1，2-二醇。而固定化ESH可提高酶的穩(wěn)定性，故在酶的催化中較為常見。L-酒石酸是一種天然有機(jī)酸，可用于食品添加劑和醫(yī)藥行業(yè)。本文主要研究固定化ESH的催化性質(zhì)及動(dòng)力學(xué)性質(zhì)，研究了瓊脂糖固定化ESH生產(chǎn)L-酒石酸鹽以及L-酒石酸的酶促生產(chǎn)和離子交換對(duì)L-酒石酸的清潔生產(chǎn)。
　　1.固定化ESH的催化性質(zhì)及動(dòng)力學(xué)研

2、究
　　比較游離ESH和固定化ESH在對(duì)底物進(jìn)行催化時(shí)，溫度、pH、轉(zhuǎn)速對(duì)其的影響以及穩(wěn)定性，相對(duì)于游離ESH，固定化ESH在溫度和轉(zhuǎn)速上得到提高。而在pH上，游離ESH高于固定化ESH。確定了最適反應(yīng)溫度為37℃，最適pH為8，最適反應(yīng)轉(zhuǎn)速為150r/min。通過(guò)實(shí)驗(yàn)，計(jì)算游離ESH的Vmax=2.595 mM/min和Km=35.71 mM，固定化ESH的Vmax=1.637 mM/min和 Km=34.27 mM
　　

3、2.固定化ESH酶促轉(zhuǎn)化生產(chǎn)L-酒石酸鉀鈉
　　將ESH固定在瓊脂糖介質(zhì)上，催化生產(chǎn)L-酒石酸鉀鈉，使用的層析柱填料體積為10 mL，徑高比為1:2.5，確定了最佳流速為5 mL/min，考察了固定化ESH的催化能力，并對(duì)固定化ESH進(jìn)行洗脫和再生，仍可保持一定的催化能力。
　　3. L-酒石酸的酶促生產(chǎn)及離子交換的應(yīng)用
　　通過(guò)001×7陽(yáng)離子交換樹脂對(duì)Na＋的吸附，將L-酒石酸鈉轉(zhuǎn)變?yōu)長(zhǎng)-酒石酸，通過(guò)實(shí)驗(yàn)計(jì)算出樹脂