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文檔簡介
1、目的:
1.臨床上常用生脈飲來治療或輔助治療慢性心力衰竭。生脈飲成方制劑被2005年版、2010年版中華人民共和國藥典(第一部)收載。藥典中生脈飲質(zhì)量標準的提取工藝用滲漉法,而傳統(tǒng)的提取工藝則用水煮法。筆者用相同的給藥劑量比較了這兩種提取工藝的生脈飲提取物治療慢性心衰大鼠效果,為生脈飲臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。
2.用低中高三種劑量的滲漉提取物治療慢性心衰大鼠,選用不同層次的多項實驗指標進行觀察和檢測,對生脈飲抗
2、慢性心衰的作用機理和量效關(guān)系做初步研究。為生脈飲治療慢性心衰的物質(zhì)基礎(chǔ)研究、生脈飲的二次開發(fā)提供理論依據(jù)。
方法:
1.藥材提取方法
提取生脈飲的處方采用藥典生脈飲質(zhì)量標準中的處方。滲漉提取法參照藥典中生脈飲質(zhì)量標準的制法。水煮法則用傳統(tǒng)的方法。
2.慢性心衰大鼠模型的建立
雄性Wistar大鼠按1.5mg·kg-1體重劑量腹腔注射阿霉素,每周2次,共7周,累積總量2
3、1mg·kg-1體重進行造模;正常組(n=6)則注射相同體積的生理鹽水。
3.動物分組及給藥方法
將造模的Wistar大鼠隨機分成六組:模型組(n=10)、陽性藥物組(n=8)、滲漉低劑量組(n=8)、滲漉中劑量組(n=8)、滲漉高劑量組(n=8)、水提組(n=8)。正常組(n=6)維持不變。從第8周開始,即停止注射阿霉素后,每天上午8:00-9:00時,灌胃(ig)給藥1次,連續(xù)給予灌胃四周。陽性藥物組:卡
4、托普利按13.5mg·kg-1劑量給藥;滲漉低劑量組:按3g·kg-1劑量(以生藥材量計)給藥;滲漉中劑量組:按9g·kg-1劑量(以生藥材量計)給藥;滲漉高劑量組:按27g·kg-1劑量(以生藥材量計)給藥;水提組:按3g·kg-1劑量(以生藥材量計)給藥;正常組灌服等量蒸餾水;模型組灌服等量蒸餾水。
4.觀察指標與方法
4.1 給藥期間觀察各組大鼠食欲、毛色、體態(tài)等一般情況、行為體征、死亡狀況。
5、 4.2 給藥四周后,用生物機能試驗系統(tǒng)測定各組大鼠血流動力學指標。
4.3 實驗結(jié)束前,大鼠禁食(不禁水)12小時,然后取血清,取內(nèi)臟。稱重各臟器,計算各臟器系數(shù)。
4.4 取各組大鼠心臟,做病理切片觀察其組織學變化。
4.5 按照丙二醛(MDA)、乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒說明書檢測各組大鼠血清中丙二醛(MDA)、乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶
6、(CK)、超氧化物歧化酶(SOD)含量。
4.6 采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定各組大鼠血清腦鈉肽(BNP)濃度。操作步驟參照大鼠腦鈉素(BNP)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書,用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算各組大鼠血清腦鈉肽(BNP)濃度。
結(jié)果:
1.不同提取工藝結(jié)果比較與滲漉低劑量組相比,水提組大鼠精神萎靡不振,活動量、進食量減少。水提組大鼠心肌組織受
7、損程度比滲漉低劑量組大。與模型組相比,滲漉低劑量組大鼠血清腦鈉肽(BNP)水平極顯著降低,降低到了正常組大鼠水平附近;水提組大鼠血清腦鈉肽(BNP)水平甚至比模型組水平稍高。兩種提取物均能降低慢性心衰大鼠血清中MDA、LDH、CK活性,升高SOD水平。滲漉低劑量組和水提組大鼠SP、DP、AP、-dp/dtmax較模型組極顯著上升。
2.不同劑量結(jié)果比較滲漉低劑量組大鼠的一般狀況、行為體征和陽性藥物組相當,與正常組大鼠接近;
8、滲漉中劑量組大鼠狀況比模型組大鼠稍好;滲漉高劑量組大鼠狀況、行為體征與模型組大鼠接近。滲漉高劑量組大鼠的死亡率很高。隨著劑量的增大,滲漉提取物對慢性心衰大鼠血流動力學指標的影響并沒有呈現(xiàn)規(guī)律性變化。滲漉提取物三組實驗大鼠隨著劑量的增大,心肌組織受損程度增大。隨著劑量的增大,滲漉提取物對慢性心衰大鼠血清SOD、LDH含量的影響并沒有呈現(xiàn)規(guī)律性變化,血清MDA、CK水平變化趨勢呈現(xiàn)規(guī)律性變化。隨著滲漉提取物劑量的增大,大鼠血清腦鈉肽(BNP
9、)水平增高;滲漉高劑量組大鼠血清腦鈉肽(BNP)水平比模型組水平還稍高。
結(jié)論:
1.滲漉提取工藝治療慢性心衰大鼠的效果比水提工藝好,而且滲漉提取工藝的提取率比水煮提取工藝高。
2.滲漉提取物隨著劑量的增大治療慢性心衰大鼠的療效遞減。對其作用機理作了初步探討:滲漉低劑量提取物能改善慢性心衰大鼠血清中神經(jīng)內(nèi)分泌腦鈉肽的水平,阻斷神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)的激活,可以慢慢地修復(fù)受損的心肌組織和改善惡化的心肌功能
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