核受體RXR在炎癥刺激誘導單核-巨噬細胞分化中的作用研究.pdf

1、本文研究了核受體RXR在炎癥刺激誘導單核/巨噬細胞分化中的作用。 單核細胞向巨噬細胞分化是動脈粥樣硬化炎癥發(fā)展過程中的關鍵一步。在單核細胞分化過程中，細胞形態(tài)變?yōu)樗笮位蚍种?、細胞貼壁能力、細胞表面分化標志物（CD11b、CD36）和基質金屬蛋白酶-9（Matrix metalloproteinase-9,MMP-9）上調，這些可以作為單核/巨噬細胞分化的指標。 本研究通過以上分化指標的變化，分別從體外、體內兩部分實驗

2、觀察視黃醇X受體（Retinoid X Receptors, RXRs）特異性激動劑9-順式維甲酸（9-cisRetinoic Acid,9-cisRA）對炎癥刺激誘導單核/巨噬細胞分化的影響。 第一部分為體外實驗：通過培養(yǎng)THP-1人單核細胞系，用佛波酯（PMA）誘導分化為巨噬細胞，同時9-cisRA進行干預，通過細胞形態(tài)、四甲基偶氮唑鹽比色法（MTT）檢測細胞貼壁率、流式細胞儀檢測細胞表面標志物（CD11b、CD36）、R

3、T-PCR和Western blotting方法檢測MMP-9基因及蛋白水平表達、Gelatin Zymography法檢測細胞上清中MMP-9活性，觀察9-cisRA對THP-1單核細胞向巨噬細胞分化的影響。實驗結果顯示9-cisRA干預組梭形、分支狀細胞明顯減少，與PMA單獨作用組相比細胞貼壁率比減少約50％，細胞表面CD11b、CD36表達分別減少49.98％、28.19％，MMP-9的mRNA、蛋白水平及酶活力明顯降低，研究結果

4、證明9-cisRA抑制PMA誘導的THP-1單核細胞向巨噬細胞分化。 第二部分為體內實驗：通過Concanavalin A（ConA）誘導BALB/C小鼠腹膜炎性巨噬細胞模型，利用9-cisRA（50μg/Kg/d）腹腔注射干預，通過細胞形態(tài)、流式細胞儀檢測細胞表面標志物（CD11b、CD36）、RT-PCR和Western blotting方法分別檢測MMP-9基因及蛋白水平表達，觀察9-cisRA對小鼠腹膜炎性巨噬細胞分化

5、的影響。體內實驗結果顯示9-cisRA腹腔注射干預組梭形、分支狀細胞明顯減少，與對照組相比細胞表面CD11b、CD36表達分別減少32.10％、41.86％，MMP-9的mRNA、蛋白水平顯著下降。研究結果證明9-cisRA可抑制小鼠腹膜炎性巨噬細胞分化。 體外、體內研究結果顯示RXRs特異性激動劑9-cisRA可以顯著抑制炎癥刺激誘導的單核/巨噬細胞分化，提示RXRs可能是調控單核/巨噬細胞分化的重要途徑，上調RXRs活性可