allo-HSCT后microRNA的表達(dá)與急性移植物抗宿主病的相關(guān)性研究.pdf

1、異基因造血干細(xì)胞移植（allo-HSCT）是治愈血液惡性腫瘤的重要手段之一，可顯著提高患者的生存率，但急性移植物抗宿主病（aGVHD）仍然是allo-HSCT后的主要并發(fā)癥之一。HLA全相合患者allo-HSCT后aGVHD發(fā)生率為40％~60%。aGVHD是一種免疫失調(diào)疾病，影響多個(gè)器官和系統(tǒng)，其中最常見(jiàn)臟器包括皮膚、胃腸道、肝臟、皮膚及肺臟。目前aGVHD的診斷主要依靠臨床癥狀及組織病理學(xué)，仍缺乏有效的生物學(xué)標(biāo)志物。因此，尋找aGV

2、HD新的生物學(xué)標(biāo)志物，及早發(fā)現(xiàn)和確診aGVHD對(duì)allo-HSCT后aGVHD預(yù)防及治療具有重要意義。
　　miRNA是在真核生物中發(fā)現(xiàn)的一類(lèi)內(nèi)源性的具有調(diào)控功能的非編碼RNA，其大小約20-25個(gè)核苷酸。miRNA通過(guò)與靶基因3’-UTR區(qū)域完全或不完全配對(duì)，識(shí)別并靶向結(jié)合相應(yīng)靶基因的mRNA從而在轉(zhuǎn)錄后水平或翻譯水平對(duì)靶基因進(jìn)行調(diào)控。越來(lái)越多的證據(jù)表明miRNA可以穩(wěn)定存在于各種體液中，有望成為診斷腫瘤、肝臟損傷、心力衰竭等新

3、的生物標(biāo)志物。
　　Xiao等首先報(bào)道了Allo-HSCT后患者血漿中的miRNA在aGVHD表達(dá)增高，可能成為監(jiān)測(cè)和診斷aGVHD的生物標(biāo)記物。那么，這些miRNAs是否能夠在中國(guó)人群中實(shí)現(xiàn)生物標(biāo)志物的作用？因此，本實(shí)驗(yàn)擬研究miRNAs在Allo-HSCT后患者血漿中的差異表達(dá)，同時(shí)利用生物信息數(shù)據(jù)庫(kù)，尋找miR-199a-3p的靶基因，并確認(rèn)miR-199a-3p與CD44之間的關(guān)系。
　　目的：探討miRNAs在Al

4、lo-HSCT后患者血漿中的差異表達(dá)，在利用生物信息數(shù)據(jù)庫(kù)，尋找miRNA的靶基因，并在細(xì)胞水平驗(yàn)證。
　　方法：利用quantitative Real Time PCR（qRT-PCR）方法驗(yàn)證分析miRNA在異基因造血干細(xì)胞移植后的差異表達(dá)；尋找miRNA的靶基因，利用qRT-PCR方法驗(yàn)證。
　　結(jié)果：
　　1.miR-199a-3p、miR-93*、miR-423在aGVHD與non-aGVHD組內(nèi)移植前表達(dá)無(wú)

5、差異，P>0.05。
　　2.miR-199a-3p、miR-93*、miR-423在aGVHD較non-aGVHD組高表達(dá)，P<0.05；miR-377在non-aGVHD組和aGVHD組無(wú)差異表達(dá)P>0.05。
　　3.miR-199a-3p的靶基因CD44在aGVHD組較non-aGVHD組中低表達(dá)，P<0.05。
　　4.在aGVHD組miR-199a-3p與CD44之間呈明顯負(fù)相關(guān)，Pearson相關(guān)系數(shù)為-