有氧運動聯(lián)合雷氏蛛毒對小鼠H22肝腫瘤的干預(yù)研究.pdf

1、研究目的:本實驗以誘發(fā)皮下腫瘤小鼠為研究對象，通過有氧運動及雷氏蛛毒輸注的方法進行干預(yù)，觀察有氧運動聯(lián)合雷氏蛛毒干預(yù)對小鼠皮下誘發(fā)肝腫瘤的干預(yù)作用，探討腫瘤的增殖和凋亡過程中可能起到的作用及分子機制。
　　研究方法:110只雄性KM小鼠，以皮下移植法構(gòu)建H22小鼠肝腫瘤模型。建模成功小鼠隨機分為5組:0.5ug/g，1ug/g、2ug/g、4ug/g和8ug/g組，每組10只。建模成功小鼠，每隔一天尾靜給藥1次，連續(xù)20天。一般行

2、為學(xué)和腫瘤體積變化觀察，繪制蛛毒藥效曲線并進行最優(yōu)劑量的篩選。隨后以相同建模建模方法，構(gòu)建模型對照組，雷氏蛛毒低劑量、中劑量、高劑量組、有氧運動組及有氧運動聯(lián)合雷氏蛛毒干預(yù)組，每組10只，每四天測量1次腫瘤體積。每隔一天尾靜脈注射雷氏蛛毒1次，連續(xù)給藥20天。模型對組、雷氏蛛毒低劑量、中劑量、高劑量組，停藥后第二天，禁食過夜進行全血及組織取材。有氧游泳運動訓(xùn)練與有氧運動聯(lián)合雷氏蛛毒干預(yù)組，5周后所有小鼠禁食過夜進行全血及組織取材。計算抑

3、瘤率;HE染色法觀察H22腫瘤細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)變化;免疫組化技術(shù)檢測H22腫瘤組織中PI3K、Akt、mTOR蛋白水平的差異表達;實時定量PCR技術(shù)檢測H22腫瘤組織中PTEN、mTOR、Bcl-2、Bax基因的mRNA表達水平。
　　研究結(jié)果:腫瘤體積變化顯示，模型對照組腫瘤體積生長速度最快，有氧運動聯(lián)合雷氏蛛毒組腫瘤體積生長速度最慢。抑瘤率結(jié)果顯示，有氧運動組腫瘤抑制率明顯高于其他組。HE染色結(jié)果顯示，模型對照組小鼠腫瘤組織排列較

4、密集，雷氏蛛毒低劑量組腫瘤組織排列欠規(guī)則并出現(xiàn)較小壞死區(qū)，雷氏蛛毒中劑量組組織內(nèi)部出現(xiàn)大片壞死區(qū)，雷氏蛛毒高劑量組腫瘤組織內(nèi)部可見明顯壞死區(qū)，有氧運動組小鼠腫瘤組織排列疏松、不規(guī)則，有氧運動聯(lián)合雷氏蛛毒干預(yù)組小鼠腫瘤組織內(nèi)部可見較大壞死區(qū)。免疫組化檢測顯示:有氧運動聯(lián)合雷氏蛛毒干預(yù)組PI3K、Akt、mTOR陽性表達最低，模型對照組PI3K、Akt、mTOR陽性表達最高。Real-timePCR檢測顯示:雷氏蛛毒低劑量、中劑量、高劑量、

5、有氧運動和有氧運動聯(lián)合雷氏蛛毒干預(yù)組，腫瘤PTEN、BaxmRNA表達水平顯著高于模型對照組(P＜0.01)，而Bcl-2、mTORmRNA表達較模型對照組低(P＜0.01);與其他組相比，有氧運動聯(lián)合雷氏蛛毒干預(yù)組PTEN、BaxmRNA表達水平最高，Bcl-2、mTORmRNA表達較其他組最低。
　　結(jié)論:雷氏蛛毒低劑量、中劑量、高劑量組、有氧運動組及有氧運動聯(lián)合雷氏蛛毒干預(yù)組，對小鼠H22肝癌細胞株誘發(fā)的皮下肝腫瘤有明顯的抑