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1、目的通過兩部分實(shí)驗(yàn)觀察刺參酸性粘多糖(SJAMP)及其與氟尿嘧啶(5-FU)聯(lián)用對(duì)H22荷瘤小鼠腫瘤生長(zhǎng)的抑制作用及對(duì)H22荷瘤小鼠免疫功能的影響,以探討SJAMP的抗腫瘤作用機(jī)制和對(duì)5-FU的減副增效作用。
方法實(shí)驗(yàn)一:將50只昆明種小鼠于右腋皮下接種H22肝癌細(xì)胞,24h后隨機(jī)分為5組,空白對(duì)照組(生理鹽水),5-FU組(20mg/kg BW),SJAMP低、中、高劑量組(6.25mg/kg BW、12.5mg/kg BW
2、、25mg/kg BW)。分組后立即給藥,連續(xù)給藥12d后處死小鼠,計(jì)算抑瘤率,胸腺指數(shù),脾臟指數(shù),ELISA檢測(cè)血清TNF-α、IL-2、IFN-β含量,中性紅法檢測(cè)腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能,CCK-8法測(cè)定脾臟淋巴細(xì)胞增殖能力、MTT法測(cè)NK細(xì)胞殺傷功能,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)小鼠外周血T細(xì)胞亞群。
實(shí)驗(yàn)二:將40只昆明種小鼠于右腋皮下接種H22肝癌細(xì)胞,24h后隨機(jī)分為4組,5-FU組(20mg/kg BW)、SJAMP組(25mg
3、/kg BW))、SJAMP+低劑量5-FU組(SLAMP25mg/kg BW和5-FU10mg/kg BW)和SJAMP+高劑量5-FU組(SLAMP25mg/kg BW和5-FU20mg/kg BW)。其他方法同上。
結(jié)果實(shí)驗(yàn)一:實(shí)驗(yàn)?zāi)┢冢琒JAMP各組小鼠體重增長(zhǎng)明顯高于5-FU組(P<0.05)。SJAMP各組小鼠瘤重均低于空白對(duì)照組,SJAMP高劑量組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與空白對(duì)照組相比,SJAMP各組
4、小鼠脾臟指數(shù)增高,其中SJAMP中劑量組和SJAMP高劑量組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),小鼠胸腺指數(shù)降低,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。SJAMP各組巨噬細(xì)胞吞噬能力、小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖能力和NK細(xì)胞活性高于空白對(duì)照組,SJAMP高劑量組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),SJAMP中劑量組脾淋巴細(xì)胞增殖能力和NK細(xì)胞活性差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義((P<0.05)。ELISA結(jié)果示,與空白對(duì)照組相比,SJAMP各組小鼠血清TNF-α顯著降低(P<0.
5、05);血清IL-2和IFN-β升高,SJAMP高劑量組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),SJAMP中劑量組血清IL-2差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果示,SJAMP各組CD3+CD4+T細(xì)胞/CD3+CD8+T細(xì)胞比值均高于空白對(duì)照組和5-FU組(P<0.05)。
實(shí)驗(yàn)二:與5-FU組相比,SJAMP+高劑量5-FU組瘤重顯著降低(P<0.05),聯(lián)合用藥組小鼠免疫功能有較明顯改善,其中SJAMP+低劑
6、量5-FU組小鼠脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)、腹腔巨噬細(xì)胞吞噬中性紅能力、脾淋巴細(xì)胞增殖能力、NK細(xì)胞活性、血清IL-2水平、血清IFN-β水平和CD3+CD4+T細(xì)胞/CD3+CD8+T細(xì)胞比值均顯著增高(P<0.05),SJAMP+高劑量5-FU組小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬中性紅能力、脾淋巴細(xì)胞增殖能力、血清IL-2水平和CD3+CD4+T細(xì)胞/CD3+CD8+T細(xì)胞比值顯著增高(P<0.05)。
結(jié)論1.SJAMP能抑制H22荷瘤小鼠腫
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