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文檔簡介
1、目的:探討冬蟲夏草(Cordyceps sinensis,CS)對他克莫司(Tacrolimus,TAC)誘導的大鼠腎及胰腺損傷的保護作用及其機制。
方法:36只雄性SD大鼠隨機分為4組(每組9只),正常對照組(VH):0.25mL/kg/d橄欖油皮下注射和生理鹽水1ml/kg/d灌胃;CS組:CS5g/kg/d灌胃;TAC組:TAC1.5mg/kg/d皮下注射和生理鹽水1ml/kg/d灌胃;TAC+CS組:TAC1.5mg/
2、kg/d皮下注射,CS5g/kg/d灌胃,各組4周。4周后利用糖耐量實驗(An intraperitoneal Glucose tolerance test,IPGTT)檢測大鼠血糖,糖促胰島素分泌實驗(Glucose-stimulated insulin secretion,GSIS)檢測胰島素濃度。利用免疫組化法檢測胰島大小。采用ELISA法測定各組大鼠血漿尿8-羥基脫氧鳥苷(8-hydroxy-2'-deoxyguanosine,
3、8-OHdG)的表達和尿8-OHdG排泄率,應用免疫組化法檢測腎組織中骨橋蛋白(Osteopontin,OPN)、外胚層發(fā)育不良抗體(Ectodermal Dysplasial,ED-1)、腎母細胞瘤蛋白抗體(Wilms Tumor protein,WT1)、錳超氧化物歧化酶(Manganese-containingsu2 peroxidedismutase,MnSOD)和含半胱氨酸的天冬酸蛋白水解酶3(Cysteinyl aspart
4、ate specific proteinase,Caspase-3)的表達;Masson三色染色法觀察腎間質(zhì)纖維化程度(Tubulointerstitialfibrosis,TIF),應用免疫印跡法檢測MnSOD和Caspase-3的表達,采用TUNEL染色法觀察腎組織中的凋亡細胞。
結(jié)果:
1.與VH組相比,TAC組大鼠的體重明顯降低,24小時尿量及攝水量、血肌酐和尿素氮均升高(p<0.05),與TAC組相比,CS
5、+TAC組大鼠體重增加,血肌酐和尿素氮均降低(p<0.05)。
2.與VH相比,TAC組血糖明顯升高,血漿胰島素濃度和胰島大小均明顯降低;與TAC組相比,CS+TAC組胰島功能明顯改善(均p<0.05)。
3.與VH組相比,TAC組TIF和WT1表達明顯升高;與TAC組相比,CS+TAC組TIF(10.8±2.4 vs5.2±0.6)和WT1表達明顯下降(15.8±0.6 vs10.3±0.9,p<0.05)。
6、> 4.與VH組相比,TAC組大鼠腎組織中OPN和ED-1表達明顯升高;與TAC組相比,CS+TAC組OPN(9.3±0.8 vs3.4±0.3)和ED-1表達明顯降低(23.1±2.5 vs14.8±1.8,p<0.05)。
5.與VH組相比,TAC組尿8-OHdG排泄率增加,血清8-OHdG含量增加;與TAC組相比,CS+TAC組尿8-OHdG(220.0±12.0ng/d vs145.2±14.2ng/d)和血清8-O
7、HdG(3±0.06ng/ml vs1.34±0.05ng/ml,均p<0.05)均顯著降低。與VH組相比,TAC組MnSOD表達降低,與TAC組相比,CS+TAC組MnSOD(1.3±0.5 vs5.6±0.7,p<0.05)表達升高。
6.與VH組相比,TAC組Caspase-3的表達增高、TUNEL陽性細胞數(shù)增高,與TAC組相比,CS+TAC組兩者表達均明顯下降(Caspase-3:8.9±0.8 vs3.6±0.6,
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