他克莫司對(duì)2型糖尿病大鼠腎臟TRPC6表達(dá)的影響.pdf

1、目的：研究糖尿病腎病（DKD)大鼠腎臟Nephrin、瞬時(shí)受體電位陽(yáng)離子通道蛋白6(TRPC6)表達(dá)與分布，以及他克莫司對(duì)DKD大鼠腎臟Nephrin、TRPC6表達(dá)的影響及其作用機(jī)制。
　　方法：選取健康雄性清潔級(jí)Wistar大鼠40只，隨機(jī)抽取10只作為正常對(duì)照組(NC組)，NC組給予常規(guī)飼料喂養(yǎng)。其余30只大鼠給予高脂高糖喂養(yǎng)8周后，小劑量鏈脲佐霉素（30mg/kg)腹腔注射，建立2型糖尿病模型。將造模成功的22只大鼠隨機(jī)分

2、為2組：糖尿病腎病組(DKD組)和他克莫司治療組（FK組，0.5mg.kg-1d-1)。造模成功大鼠在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間均不應(yīng)用胰島素及降糖藥。各組大鼠分別于STZ注射前及1周后和用藥0、4、8、12周末，測(cè)各組大鼠體重(BW)、收縮壓（SBP)、空腹血糖(FBG)、空腹血胰島素(FINS)、膽固醇(TC)、甘油三酯（TG)、血肌酐(Scr)、谷氨酸丙酮酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT)、谷氨酸草酰乙酸轉(zhuǎn)氨酶（AST)、血常規(guī)等，留24h總尿量，并測(cè)24h尿

3、白蛋白量(UAL)及尿肌酐（Ucr)，并計(jì)算內(nèi)生肌酐清除率(Ccr)及胰島素敏感指數(shù)(ISI)。藥物干預(yù)12周末處死大鼠，取出腎臟，去除包膜，一腎稱(chēng)重，并測(cè)定腎重指數(shù)（KW/BW)。同時(shí)取腎組織，光鏡下觀察腎臟組織形態(tài)學(xué)變化，電鏡觀察足細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)變化，實(shí)時(shí)定量PCR及Western-blot測(cè)定腎臟Nephrin、TRPC6的表達(dá)變化。
　　結(jié)果：造模Wistar大鼠30只，成功22只，造模成功率達(dá)73％。與NC組相比，DKD組

4、足細(xì)胞TRPC6 mRNA及蛋白水平明顯升高(P﹤0.01)，Nephrin mRNA及蛋白水平明顯降低(P﹤0.01)，F(xiàn)BG、FINS、TC、TG、KW/BW、UAL、Ccr明顯升高（P﹤0.01）；與DKD組相比，F(xiàn)K組TRPC6的表達(dá)下降及Nephrin的表達(dá)上調(diào)(P﹤0.01)，同時(shí)KW/BW、UAL明顯降低(P﹤0.01),而其他指標(biāo)無(wú)明顯變化。光鏡下觀察DKD組，腎小球明顯增大，系膜細(xì)胞增生，基底膜增厚；電鏡下觀察DKD組