Rho GTPase-cofilin信號通路在急性離心運動誘導骨骼肌解聚及針刺干預中的作用.pdf

1、目的：了解Rho GTPase/cofilin信號通路在離心運動引起的骨骼肌解聚及針刺干預的作用，為探討運動導致的骨骼肌超微結(jié)構(gòu)改變發(fā)生的機制及針刺恢復骨骼肌超微結(jié)構(gòu)的機制提供重要的理論依據(jù)。
　　方法：將8周齡SD大鼠分為安靜對照、運動、針刺、運動+針刺組。運動組大鼠進行坡度-16°，16米/分的跑臺運動90分鐘；針刺干預方案斜刺大鼠下肢比目魚肌，留針2分鐘。干預后即刻、12、24、48、72、120小時取材，免疫組化和免疫熒光

2、等方法觀察骨骼肌F-actin解聚情況和cofilin2及F-actin的分布、定位及其熒光表達；免疫印跡法測試各組大鼠Rho、Rac1、Cdc42、LIM及LIM磷酸化、cofilin2及cofilin磷酸化等7個指標的蛋白表達。
　　結(jié)果：（1）急性離心運動可導致大鼠骨骼肌Rho GTPase家族中Rho蛋白表達降低（P<0.01），通過LIM磷酸化的降低（P<0.01），導致cofilin2磷酸化程度降低（P<0.01）。此

3、時，Rho GTPase家族中Cdc42、Rac1蛋白表達的增加（P<0.01）不能拮抗這種降低趨勢，導致骨骼肌肌動蛋白在運動后24小時明顯解聚，在72小時解聚現(xiàn)象最活躍。（2）安靜狀態(tài)大鼠針刺后12到24小時，可以通過Rho GTPase家族中Rho和Rac1蛋白表達升高（P<0.01），提高LIM磷酸化（P<0.01）從而促進cofilin2磷酸化的升高（P<0.01），維持骨骼肌肌動蛋白結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，在24小時恢復效果較明顯；針刺導致

4、的 Cdc42蛋白表達的降低并不足以抑制cofilin2磷酸化的升高趨勢。（3）針刺可以通過Rho、Rac1蛋白表達的升高（P<0.01），影響離心運動后大鼠骨骼肌LIM磷酸化的升高（P<0.01）從而提高cofilin2磷酸化（P<0.01），維持肌動蛋白多聚體結(jié)構(gòu)；抑制了運動導致 cofilin2磷酸化水平降低的趨勢，針刺后12小時就發(fā)揮了維持骨骼肌肌動蛋白穩(wěn)定的作用。
　　結(jié)論：（1）急性離心運動主要通過下調(diào)Rho蛋白，抑制