TRP通道在針刺干預(yù)運(yùn)動(dòng)性骨骼肌微損傷效應(yīng)中的作用研究.pdf

1、1.目的：
　　不習(xí)慣或劇烈離心運(yùn)動(dòng)引起的骨骼肌微損傷導(dǎo)致了肌力下降、延遲性肌肉酸痛等癥狀，嚴(yán)重影響了運(yùn)動(dòng)員的訓(xùn)練成績(jī)。研究發(fā)現(xiàn)，針刺干預(yù)可以快速恢復(fù)離心運(yùn)動(dòng)性骨骼肌微損傷，但治療機(jī)制仍不十分清楚。最新研究發(fā)現(xiàn)，TRP通道與針刺效應(yīng)有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)采用離心運(yùn)動(dòng)性骨骼肌微損傷動(dòng)物模型，旨在探討針刺促進(jìn)骨骼肌超微結(jié)構(gòu)恢復(fù)的作用機(jī)制。
　　2.方法：
　　96只健康雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為4組：安靜對(duì)照組（C）、運(yùn)動(dòng)組（E）

2、、運(yùn)動(dòng)針刺組（EA）與運(yùn)動(dòng)針刺阻斷劑組（EAI）。C組自由飲食，運(yùn)動(dòng)組采用動(dòng)物跑臺(tái)下坡跑離心運(yùn)動(dòng)方式，進(jìn)行90min下坡跑（坡度為-16°，速度為16m·min-1）運(yùn)動(dòng)。E組運(yùn)動(dòng)后無(wú)任何干預(yù)恢復(fù)措施；EA組運(yùn)動(dòng)即刻，用直徑0.25mm毫針縱向斜刺兩側(cè)趾長(zhǎng)伸肌，并留針4min；EAI組運(yùn)動(dòng)后即刻，于大鼠尾部靜脈注射TRP通道阻斷劑GdCl3溶液，30min后針刺。2 h、6 h、24 h、48h、120 h后，分別取各組大鼠趾長(zhǎng)伸肌，用

3、于透射電子顯微鏡觀察，并用Image J（NIH）圖像分析軟件進(jìn)行量化，分析不同時(shí)相大鼠骨骼肌超微結(jié)構(gòu)變化（Z線斷裂、模糊、水波紋），線粒體形態(tài)(面積、周長(zhǎng)、圓度、費(fèi)雷特直徑、縱橫比、形狀因子)和數(shù)量變化，相鄰線粒體間的高電子密度位點(diǎn)（inter mitochondrial junctions，IMJs）數(shù)量變化和肌膜胞膜窖數(shù)量變化。
　　3.結(jié)果：
　　3.1.骨骼肌超微結(jié)構(gòu)變化：E、EA、EAI三組Z線完整程度均呈現(xiàn)出先

4、降低后升高的趨勢(shì)，最嚴(yán)重?fù)p傷時(shí)間均出現(xiàn)在24 h，但針刺組損傷程度最輕，TRP通道阻斷劑非常顯著的減弱了針刺效應(yīng)。
　　3.2.肌原纖維間線粒體形態(tài)變化：EA與E、EAI相比，肌原纖維間線粒體面積、周長(zhǎng)、費(fèi)雷特直徑、形狀因子右移，圓度左移，且分布具有顯著性差異（P<0.05），6 h、24 h線粒體形狀因子有極顯著性增加（P<0.001），48 h和120 h稍有下調(diào)。
　　3.3.肌膜下線粒體形態(tài)變化：EA與E、EAI相比

5、，肌膜下和肌原纖維間線粒體面積、周長(zhǎng)、費(fèi)雷特直徑、形狀因子右移，圓度左移，且分布具有顯著性差異（P<0.05）。EA與E相比，形狀因子在6 h有非常顯著性增加（P<0.01），在24 h有極顯著性增加（P<0.001）。EA與EAI相比，形狀因子在6 h、48 h有極顯著性增加（P<0.001）。
　　3.4.肌原纖維間線粒體數(shù)量變化：E、EA、EAI三組肌原纖維間線粒體數(shù)量均呈先降低后升高的趨勢(shì)，24 h最少。針刺干預(yù)組24 h

6、之后迅速上升，運(yùn)動(dòng)組和針刺阻斷劑組雖然在24 h后上升幅度不如針刺干預(yù)組顯著。
　　3.5.肌膜下線粒體數(shù)量變化：E、EA、EAI三組肌膜下線粒體數(shù)量均呈現(xiàn)出先升高后降低的趨勢(shì)，且峰值均出現(xiàn)在24 h，針刺干預(yù)組肌膜下線粒體數(shù)量最多，EA與E相比，24 h有非常顯著性增加（P<0.01），48 h有顯著性增加（P<0.05）；EA與EAI相比，2 h有非常顯著性增加（P<0.01），24 h，48 h有極顯著性增加（P<0.001

7、）。
　　3.6.IMJs數(shù)量變化：E、EA、EAI三組肌膜下和及原纖維間線粒體IMJs數(shù)量均呈現(xiàn)出先升高后降低的趨勢(shì)，且峰值均出現(xiàn)在24 h，但針刺干預(yù)組數(shù)量最多，TRP通道阻斷劑非常顯著的減弱了針刺效應(yīng)。
　　3.7.胞膜窖數(shù)量變化：E組胞膜窖數(shù)量均高于EA組和EAI組，E組和EA組峰值均出現(xiàn)在24 h，EAI組總體趨勢(shì)變化不大。
　　4.結(jié)論：
　　4.1.一次急性離心運(yùn)動(dòng)會(huì)引起骨骼肌超微結(jié)構(gòu)損傷，胞膜窖、