廣西生何首烏天然小分子化合物的提取分離及抗腫瘤活性篩選.pdf

1、目的：應(yīng)用經(jīng)典的提取分離方法從廣西生何首烏中提取分離小分子天然化合物，并對其進(jìn)行抑制卵巢癌細(xì)胞生長活性的篩選。
　　 方法：(1)利用系統(tǒng)溶劑萃取法、重結(jié)晶法、硅膠柱色譜、聚酰胺柱色譜、SephadexLH-20柱色譜等分離手段對生何首烏水提取物及乙酸乙酯回流物進(jìn)行了分離，并通過理化性質(zhì)和波譜分析鑒定所獲得的小分子化合物的結(jié)構(gòu)。(2)通過MTT法檢測小分子化合物對卵巢癌SKOV-3細(xì)胞的生長抑制率，確定藥物的抑制活性：(3)通過

2、HE染色實(shí)驗(yàn)觀察小分子化合物對SKOV-3的細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變和對細(xì)胞增殖的影響；(4)通過AnnexinV-FITC凋亡試劑盒，檢測小分子化合物是否具有誘導(dǎo)SKOV-3細(xì)胞凋亡作用；(5)將沒食子酸分別與順鉑和丁酸鈉聯(lián)用，MTT法測定其是否具有協(xié)同作用。
　　 結(jié)果：(1)從生首烏水提取物及乙酸乙酯回流物分離獲得9個化合物，其4個經(jīng)波譜分析鑒定，分別是大黃素、表兒茶素、二苯乙烯苷、沒食子酸。(2)MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明沒食子酸對SK

3、OV-3細(xì)胞的抑制作用最強(qiáng)，其IC50為23.4μg·ml-1。(3)HE染色發(fā)現(xiàn)IC50濃度的大黃素、表兒茶素、沒食子酸能抑制SKOV-3細(xì)胞增殖，細(xì)胞胞質(zhì)濃縮、深染。(4)在熒光倒置顯微鏡下觀察到IC50濃度的表兒茶素、沒食子酸能誘導(dǎo)SKOV-3細(xì)胞凋亡。(5)無細(xì)胞毒作用的濃度8.5μg·ml-1的沒食子酸與低于IC50濃度的順鉑聯(lián)用，能協(xié)同抑制卵巢癌細(xì)胞株SKOV-3的增殖；而與丁酸鈉聯(lián)用只能起到簡單加和作用。
　　 結(jié)