生物氧化4-甲基環(huán)己酮的研究.pdf

1、本文首先檢測(cè)了CHMO（環(huán)己酮單加氧酶）和PAMO（苯基丙酮單加氧酶）兩種酶對(duì)4-甲基環(huán)己酮的氧化作用。原始的PAMO酶無(wú)氧化作用。對(duì)PAMO基因Gln93Asp/Pro94Asp兩個(gè)點(diǎn)突變后，能夠催化4-甲基環(huán)己酮，但是催化活力極低。對(duì)4-甲基環(huán)己酮催化活力比較高的CHMO酶進(jìn)行生物催化研究。通過(guò)自誘導(dǎo)的方法極大的提高了CHMO的酶活，提高了26倍左右。
　　 為了解決底物和產(chǎn)物對(duì)CHMO酶催化氧化4-甲基環(huán)己酮的抑制問題，初

2、步研究了樹脂原位底物供給和產(chǎn)物分離技術(shù)。對(duì)9種樹脂進(jìn)行篩選比較，得到一種對(duì)4-甲基環(huán)己酮及其產(chǎn)物具有較強(qiáng)吸附作SD600，對(duì)樹脂和底物的添加比例進(jìn)行比較，得出1∶2的添加比例比較好。此時(shí)溶液中底物濃度既不能抑制酶的活性，同時(shí)反應(yīng)還能以較快的速率進(jìn)行。通過(guò)樹脂原位底物供給和產(chǎn)物分離技術(shù)(SFPR)，CHMO催化4-甲基環(huán)己酮的底物濃度得到了提高。50mM的底物濃度條件下，轉(zhuǎn)化率達(dá)到了60％左右，而不加樹脂的時(shí)候，轉(zhuǎn)化率只有6％左右，轉(zhuǎn)化率