川芎嗪對(duì)博萊霉素致大鼠肺間質(zhì)纖維化的防治作用.pdf

1、目的：本研究利用博萊霉素導(dǎo)致的肺間質(zhì)纖維化大鼠作為模型，研究川芎嗪對(duì)肺間質(zhì)纖維化的防治作用及其發(fā)病機(jī)制。
　　 方法：80只健康清潔級(jí)雄性SD大鼠隨機(jī)分為4組：正常組、模型組，陽性藥物組（醋酸強(qiáng)的松）和川芎嗪組，每組20只。術(shù)后第二天開始灌胃給藥，陽性藥物組給予醋酸強(qiáng)的松1.5mg/kg/d，川芎嗪組給予川芎嗪20mg/kg/d，模型組給予等體積的生理鹽水。實(shí)驗(yàn)期間，大鼠自由飲水和進(jìn)食，給藥14d后，每組隨機(jī)取10只動(dòng)物處死，取

2、肺組織，給藥28d后處死其余動(dòng)物，檢測以下指標(biāo)：稱量大鼠體重、肺組織重量比較體重變化和肺系數(shù)；應(yīng)用生化試劑盒檢測SOD，GSH-Px，MDA和iNOS在肺組織中的表達(dá)；制作肺組織石蠟切片，進(jìn)行HE、Mallroy 染色；制作肺組織冰凍切片，進(jìn)行caspase-3免疫組化染色和端粒酶TERT 原位雜交染色。
　　 結(jié)果：1.光鏡下HE 染色結(jié)果：14d，正常組終末細(xì)支氣管、呼吸性細(xì)支氣管、ⅠⅡ型肺泡細(xì)胞結(jié)構(gòu)正常。模型組出現(xiàn)了大量的

3、纖維增生灶和實(shí)變區(qū)。陽性藥物組炎癥和纖維化灶交錯(cuò)，部分小支氣管周圍可見實(shí)變區(qū)。川芎嗪組也表現(xiàn)出炎癥和纖維化灶。28d，正常組結(jié)構(gòu)未見異常。模型組大鼠纖維化程度明顯，有大片實(shí)變區(qū)，支氣管周圍纖維化程度較高。部分肺泡壁明顯增厚，肺泡結(jié)構(gòu)紊亂，肺泡間隔纖維化病灶顯著。部分肺泡腔擴(kuò)張呈囊狀，肺泡壁斷裂，肺泡腔萎陷。陽性藥物組情況有所好轉(zhuǎn)，肺泡間隔纖維化程度不高，比模型組間隔寬。支氣管周圍仍可見纖維病灶，部分肺泡及細(xì)支氣管內(nèi)可見散在的炎性細(xì)胞。川

4、芎嗪組情況明顯好轉(zhuǎn)，肺泡間隔纖維增生灶較少，肺泡內(nèi)未見明顯的炎性細(xì)胞。細(xì)支氣管周圍的纖維化程度明顯低于模型組及陽性藥物組。2.Mallory 染色結(jié)果：14d、28d，正常組僅在小支氣管周圍及肺泡間隔存在少量的膠原纖維。14d，模型組增厚的肺泡間隔，小支氣管周圍均有藍(lán)色膠原纖維增生。川芎嗪組肺泡間隔，小支氣管周圍僅有少量膠原纖維增生。陽性藥物組膠原含量介于模型組和川芎嗪組之間。28d，模型組，大鼠肺泡壁及間隔，小支氣管周圍，小支氣管管壁

5、均有大量藍(lán)色膠原纖維增生。陽性藥物組增厚的肺泡間隔，小支氣管周圍膠原含量較高。川芎嗪組纖維化程度低，膠原含量較少，僅在部分小支氣管周圍有少量膠原。3.生化指標(biāo)測定結(jié)果：與正常組相比，模型組大鼠肺組織中SOD和GSH-Px 活性下降，MDA水平明顯升高。與模型組相比，川芎嗪能調(diào)節(jié)肺纖維化大鼠體內(nèi)的自由基代謝，升高大鼠體內(nèi)SOD和GSH-Px 活性，降低MDA水平。模型組大鼠肺組織內(nèi)的iNOS活性高于正常組，用川芎嗪治療肺纖維化大鼠后，大鼠

6、肺組織的iNOS 活性有一定程度的降低。其中模型組14d與28d 相比，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而川芎嗪組14d與28d 相比，也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4.caspase-3免疫組化染色結(jié)果：正常組大鼠肺組織caspase-3幾乎不表達(dá)；模型組14d、28d大鼠肺組織小支氣管上皮細(xì)胞均出現(xiàn)了強(qiáng)陽性表達(dá)，部分肺泡上皮也有表達(dá)。陽性藥物組和川芎嗪組14d、28d肺組織小支氣管上皮細(xì)胞也出現(xiàn)了陽性表達(dá)，但川芎嗪組28d 肺組織小支氣管上皮細(xì)胞呈現(xiàn)弱陽性表達(dá)

7、。5.端粒酶TERT 原位雜交染色結(jié)果：端粒酶TERT 正常組在大鼠肺組織部分小支氣管周圍有少量表達(dá)，其它部位基本不表達(dá)。模型組14d、28d肺組織小支氣管周圍均出現(xiàn)了強(qiáng)陽性表達(dá)，部分肺泡上皮也有表達(dá)。陽性藥物組和川芎嗪組14d、28d 肺組織小支氣管周圍也出現(xiàn)了陽性表達(dá)，但川芎嗪組28d 肺組織小支氣管周圍呈現(xiàn)弱陽性表達(dá)。
　　 結(jié)論：1.川芎嗪能調(diào)節(jié)肺纖維化大鼠體內(nèi)自由基水平，減輕自由基對(duì)肺組織結(jié)構(gòu)的氧化損傷，對(duì)特發(fā)性肺纖維