川芎嗪對博萊霉素致肺間質纖維化大鼠MMPs表達的影響.pdf

1、目的：
　　 本研究采用博萊霉素導致的肺間質纖維化大鼠作為模型，研究川芎嗪對博萊霉素致肺間質纖維化大鼠的防治作用并初步探討其作用機制。
　　 方法：
　　 40只SD 雄性大鼠隨機分為4組，每組10只。分別為正常組、模型組、陽性藥物組(醋酸強的松片)和川芎嗪組。造模第二天開始灌胃給藥，醋酸強的松組給藥劑量為1.5mg/kg/d，川芎嗪組給藥劑量為20mg/kg/d，正常組及模型組給予等體積生理鹽水。實驗期間，大鼠

2、自由飲水和進食，28天后取肺組織。檢測指標：稱量體重比較體重變化；稱量肺組織計算肺系數(shù)；HE 染色觀察肺組織形態(tài)；免疫組化染色觀察MMP-2、MMP-9的表達；western blot 法檢測MMP-9蛋白的表達量。
　　 結果：
　　 1、肺組織病理觀察HE 染色可見：正常組結構正常。模型組大鼠纖維化程度明顯，有大片實變區(qū)，支氣管周圍纖維化程度較高。部分肺泡壁顯著增厚，肺泡結構紊亂，肺泡間隔纖維化病灶顯著。部分肺泡腔擴

3、張呈囊狀，肺泡壁斷裂，肺泡腔萎陷，腔內(nèi)可見滲出物瘀積。陽性藥物組情況有所好轉，肺泡間隔纖維化程度不高，比模型組間隔窄。支氣管周圍仍可見纖維病灶，部分肺泡及細支氣管內(nèi)可見散在的炎性細胞，胸膜有增厚。川芎嗪組情況明顯好轉，肺泡間隔纖維增生灶較少，肺泡內(nèi)未見明顯的炎性細胞。細支氣管周圍的纖維化程度明顯低于模型組。
　　 2、免疫組化染色可見：MMP-2在正常組呈弱陽性表達；在模型組細支氣管上皮細胞和部分肺泡隔巨噬細胞強陽性表達，Ⅱ型細

4、胞陽性表達。川芎嗪組僅在部分肺泡隔巨嗜細胞呈陽性或弱陽性表達。陽性藥物組表達似川芎嗪組。MMP-9 正常組肺組織中僅在Ⅰ型肺泡上皮細胞和巨噬細胞有微弱表達。模型組大鼠肺組織可見支氣管上皮細胞、Ⅰ型肺泡上皮細胞、成纖維細胞、巨嗜細胞及炎性細胞均呈強陽性表達。陽性藥物組肺組織中MMP-9表達明顯減少，主要表達于支氣管上皮細胞、巨噬細胞和炎性細胞。川芎嗪組僅在支氣管上皮細胞、巨噬細胞、Ⅰ型肺泡上皮細胞呈弱陽性表達。
　　 3、 wes

5、tern blot結果：與正常組相比，模型組大鼠肺組織中MMP-9的含量明顯升高（P<0.01），與模型組相比，川芎嗪組和陽性藥物對照組均可降低肺間質纖維化大鼠肺組織中MMP-9的含量，并且川芎嗪組降低作用更明顯。
　　 結論：
　　 1、用免疫組化的方法證實：對于特發(fā)性肺纖維化大鼠川芎嗪在28d 抑制MMP-2、MMP-9蛋白在肺泡上皮細胞和間質細胞內(nèi)表達上調(diào)，通過防止基底膜損傷，防止特發(fā)性肺纖維化形成。