川芎嗪對(duì)博萊霉素致肺間質(zhì)纖維化大鼠MMPs表達(dá)的影響.pdf

1、目的：
　　 本研究采用博萊霉素導(dǎo)致的肺間質(zhì)纖維化大鼠作為模型，研究川芎嗪對(duì)博萊霉素致肺間質(zhì)纖維化大鼠的防治作用并初步探討其作用機(jī)制。
　　 方法：
　　 40只SD 雄性大鼠隨機(jī)分為4組，每組10只。分別為正常組、模型組、陽(yáng)性藥物組(醋酸強(qiáng)的松片)和川芎嗪組。造模第二天開(kāi)始灌胃給藥，醋酸強(qiáng)的松組給藥劑量為1.5mg/kg/d，川芎嗪組給藥劑量為20mg/kg/d，正常組及模型組給予等體積生理鹽水。實(shí)驗(yàn)期間，大鼠

2、自由飲水和進(jìn)食，28天后取肺組織。檢測(cè)指標(biāo)：稱量體重比較體重變化；稱量肺組織計(jì)算肺系數(shù)；HE 染色觀察肺組織形態(tài)；免疫組化染色觀察MMP-2、MMP-9的表達(dá)；western blot 法檢測(cè)MMP-9蛋白的表達(dá)量。
　　 結(jié)果：
　　 1、肺組織病理觀察HE 染色可見(jiàn)：正常組結(jié)構(gòu)正常。模型組大鼠纖維化程度明顯，有大片實(shí)變區(qū)，支氣管周圍纖維化程度較高。部分肺泡壁顯著增厚，肺泡結(jié)構(gòu)紊亂，肺泡間隔纖維化病灶顯著。部分肺泡腔擴(kuò)

3、張呈囊狀，肺泡壁斷裂，肺泡腔萎陷，腔內(nèi)可見(jiàn)滲出物瘀積。陽(yáng)性藥物組情況有所好轉(zhuǎn)，肺泡間隔纖維化程度不高，比模型組間隔窄。支氣管周圍仍可見(jiàn)纖維病灶，部分肺泡及細(xì)支氣管內(nèi)可見(jiàn)散在的炎性細(xì)胞，胸膜有增厚。川芎嗪組情況明顯好轉(zhuǎn)，肺泡間隔纖維增生灶較少，肺泡內(nèi)未見(jiàn)明顯的炎性細(xì)胞。細(xì)支氣管周圍的纖維化程度明顯低于模型組。
　　 2、免疫組化染色可見(jiàn)：MMP-2在正常組呈弱陽(yáng)性表達(dá)；在模型組細(xì)支氣管上皮細(xì)胞和部分肺泡隔巨噬細(xì)胞強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，Ⅱ型細(xì)

4、胞陽(yáng)性表達(dá)。川芎嗪組僅在部分肺泡隔巨嗜細(xì)胞呈陽(yáng)性或弱陽(yáng)性表達(dá)。陽(yáng)性藥物組表達(dá)似川芎嗪組。MMP-9 正常組肺組織中僅在Ⅰ型肺泡上皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞有微弱表達(dá)。模型組大鼠肺組織可見(jiàn)支氣管上皮細(xì)胞、Ⅰ型肺泡上皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、巨嗜細(xì)胞及炎性細(xì)胞均呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)。陽(yáng)性藥物組肺組織中MMP-9表達(dá)明顯減少，主要表達(dá)于支氣管上皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和炎性細(xì)胞。川芎嗪組僅在支氣管上皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、Ⅰ型肺泡上皮細(xì)胞呈弱陽(yáng)性表達(dá)。
　　 3、 wes

5、tern blot結(jié)果：與正常組相比，模型組大鼠肺組織中MMP-9的含量明顯升高（P<0.01），與模型組相比，川芎嗪組和陽(yáng)性藥物對(duì)照組均可降低肺間質(zhì)纖維化大鼠肺組織中MMP-9的含量，并且川芎嗪組降低作用更明顯。
　　 結(jié)論：
　　 1、用免疫組化的方法證實(shí)：對(duì)于特發(fā)性肺纖維化大鼠川芎嗪在28d 抑制MMP-2、MMP-9蛋白在肺泡上皮細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞內(nèi)表達(dá)上調(diào)，通過(guò)防止基底膜損傷，防止特發(fā)性肺纖維化形成。