博萊霉素致肺纖維化大鼠模型與肺氣虛證相關性研究.pdf

1、目的：
　　通過觀測大鼠一般情況、肺組織病理學（HE染色、MASSON染色）、免疫學指標（Ig-G、IL-4、IFN-γ）以及補肺湯對以上指標的干預作用，來評價構建以博萊霉素致肺纖維化作為病理基礎的肺氣虛大鼠模型的可行性，以深入研究中醫(yī)肺氣虛的本質(zhì)，指導肺纖維化臨床治療。
　　方法：
　　復制BLMA5致大鼠肺間質(zhì)纖維化的模型，即大鼠腹腔注射戊巴比妥鈉45mg/kg體質(zhì)量麻醉后，氣管內(nèi)給予BLMA5（按5mg/kg體質(zhì)

2、量給藥）。96只SD健康大鼠，隨機分為四組：空白組、模型組、強的松組、補肺湯組。空白組和模型組于造模后每天給予生理鹽水(1ml/100g)灌胃；補肺湯組和強的松組分別給予補肺湯流浸膏(2.1g/200g)及強的松片與生理鹽水混合制劑(6.3mg/kg)灌胃。各組分別于第7d，14d，28d各處死8只大鼠，定期觀測動物一般表現(xiàn)癥狀并記錄體質(zhì)量變化，依次收集大鼠血清和肺組織。通過病理切片HE染色觀察肺泡炎分度、MASSON染色觀察肺纖維化分

3、級來評價肺纖維化模型；通過觀測大鼠一般情況變化和用ELISA法測定血清中INF-γ、IL-4、IgG含量的變化來評價肺氣虛證模型；另外通過觀測補肺湯對于該模型的干預作用進一步證實該模型的可行性，以及其對博萊霉素所致肺纖維化大鼠的治療效果和可能的作用機理。
　　結果：
　　1、各造模組早期肺組織均以巨噬細胞、淋巴細胞為主的大量炎性細胞浸潤，后期為少量的炎性細胞浸潤，肺組織結構破壞，肺泡腔明顯縮小，肺間質(zhì)被膠原纖維和成纖維細胞替

4、代，肺間質(zhì)纖維化形成；而補肺湯組和強的松組大鼠的炎癥細胞浸潤和成纖維細胞的增生程度要低于模型組，表明補肺湯組和強的松組大鼠肺泡炎和肺纖維化程度較輕。
　　2、模型組大鼠與正常組大鼠比較，呼吸急促，心率加快，精神疲憊，活動量減少，行動遲緩，食量減少，體質(zhì)量增幅減輕，與中醫(yī)氣虛的證候特點符合。
　　3、正常組相比，模型組大鼠血清IgG表達在各時期顯著降低（P＜0.01）；強的松組大鼠各個時期血清IgG表達與正常組相比顯著降低（P

5、＜0.01）。與模型組相比，補肺湯組大鼠在各個時期的血清 IgG表達要顯著高于前者（P＜0.05）。
　　4、與正常組比較,模型組大鼠血清中IL-4的表達在各個時期明顯增高，而IFN-γ的表達在各時期明顯下調(diào)趨勢，同時IFN-γ/IL-4比值在各時期明顯下降，其差異均具有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；補肺湯組大鼠血清中IL-4的表達在第7天時顯著升高（P＜0.05）。與模型組比較，補肺湯組、強的松組大鼠血清IFN-γ在各個時期的表達

6、明顯增高（P＜0.05）；強的松組大鼠血清中IL-4的表達在各個時期的表達顯著降低（P＜0.05）；而補肺湯組血清中IL-4的表達在第28天顯著降低（P＜0.05），但在第7、14天無統(tǒng)計學意義。
　　結論：
　　1、本實驗模型組的肺組織大體標本和病理特征改變與文獻報道一致，說明肺纖維化大鼠模型造模成功。
　　2、通過觀測博萊霉素致肺纖維化大鼠模型存在中醫(yī)肺氣虛證的癥狀表現(xiàn)和相關免疫學指標的改變，說明以肺纖維化為病理基

7、礎構建肺氣虛模型是可行的。
　　3、通過補氣的經(jīng)典方劑補肺湯來干預大鼠肺纖維化的形成取得較好的實驗效果，進一步證實了博萊霉素致肺纖維化大鼠模型中存在著中醫(yī)肺氣虛證。
　　4、補肺湯對肺泡炎的發(fā)生、發(fā)展及肺纖維化的形成有較好的預防和治療作用，能延緩肺纖維化的進程，其機制可能是：增加肺纖維化大鼠血清中IgG的含量，從而改善肺纖維化大鼠的免疫功能；促進血清中IFN-γ的分泌，抑制IL-4的分泌，從而調(diào)節(jié)了Th1/Th2細胞因子失衡