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文檔簡介
1、目的:通過比較生川烏單行及生川烏與全瓜蔞配伍水浸劑對小鼠急性毒性及對大鼠的長期毒性,確定二者配伍對生川烏毒性的影響,探討中藥十八反中“烏頭反瓜蔞”藥對配伍與毒性的關(guān)系,為該藥對的臨床應用提供實驗依據(jù)。
方法:
1.藥液制備取生川烏50g,粉碎成米粒大小顆粒,加3倍pH=5 HCl溶液,超聲混合10min,浸泡12h,過濾,藥渣再加3倍pH=5 HCl溶液,浸泡6h,過濾,合并濾液,將藥液4000轉(zhuǎn)/分離心,加
2、適量NaHCO3調(diào)pH=7.5,冷凍濃縮至50ml(1g/m1)溶液備用。另取生川烏與全瓜蔞各50g,按上述方法制備生川烏配伍全瓜蔞水浸劑。
2.急性毒性試驗以“低比稀釋法”按1:0.7比例配制一系列藥液。昆明種小鼠140只,隨機分為生川烏單行組和生川烏配伍全瓜蔞組,每組70只。每組再隨機分為(以烏頭劑量計算)28 g/kg、19.6 g/kg、13.7 g/kg、9.6 g/kg、6.7 g/kg、4.7g/kg組及空白
3、對照組,ig給藥,給藥容積40ml/kg,空白對照組ig等容積蒸餾水。給藥后觀察14d。記錄小鼠中毒潛伏期、癥狀及死亡時間、恢復期及死亡數(shù)量。用改進寇氏公式計算LD50。
3.長期毒性試驗 Wistar大鼠50只,生川烏單行組(0.31g/kg),生川烏配伍全瓜蔞1g/kg、0.3g/kg、0.1g/kg組及空白對照組,每組20只,雌雄各半。給藥容積5ml/kg體重,ig給藥,每天1次,每周給藥7d,連續(xù)給藥28d,對照組
4、給予等容積蒸餾水。各組大鼠自由飲食,每周稱體重1次。給藥期間觀察大鼠一般狀態(tài)。末次給藥后24h,以0.04%水合氯醛腹腔注射麻醉2/3大鼠,腹主動脈取血,然后處死大鼠,取心、肝、脾、肺、腎、腦、胸腺、大腸、小腸、子宮、卵巢、睪丸、前列腺等器官,用生理鹽水沖洗濾紙吸干后稱重,計算臟器指數(shù),備用。余1/3大鼠停藥15d后同法麻醉取材。
檢測血液常規(guī)及心(CK、LDH)、肝(AST、ALT)、腎(BUN、Cr)功能等生化指標,主
5、要組織器官進行病理形態(tài)學檢查。
結(jié)果:
1.急性毒性中毒表現(xiàn)為一系列中樞神經(jīng)系統(tǒng)及軀體運動系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)癥狀,如惡心、嘔吐、咳嗽、運動麻痹等,動物死前多出現(xiàn)數(shù)次跳躍,狂躁不安,繼之肢體抽搐、震顫、瞳孔散大、遺尿,最后死于呼吸衰竭。生川烏單行動物中毒反應的潛伏期為2.6-9.3min;恢復時間為43.3-250.0 min;死亡時間為8.0-29.5 min。生川烏配伍全瓜萎動物中毒反應的潛伏期為3
6、.40-4.60,恢復時間為54.6-1126.0 min;死亡時間為8.67-13.7min。
生川烏單行LD50為9.26g/kg,95%可信限為7.70 g/kg-11.15g/kg。生川烏配伍全瓜萎LD50為7.48g/kg,95%可信限為6.40 g/kg-8.74 g/kg。生川烏單行水浸劑LD50大于生川烏配伍全瓜蔞LD50。
2.長期毒性
2.1.一般狀態(tài)實驗期間,各組動物無死亡
7、,一般狀況良好。給藥組動物體重增長率與空白對照組比較差異無顯著意義(P>0.05)。
2.2.毒性反應癥狀各給藥組動物均于給藥后5-10min出現(xiàn)不同程度的活動減少、惡心、嘔吐、咳嗽等中毒癥狀。毒性反應程度與給藥劑量呈正相關(guān),毒性反應在給藥后3-5 h內(nèi)逐漸消失。對照組動物未出現(xiàn)上述癥狀。
2.3.臟器指數(shù)肉眼觀察,大鼠臟器組織無異常變化。生川烏組及烏瓜配伍各劑量組雌性大鼠腎臟系數(shù)高于對照組(P<0.05);
8、胸腺系數(shù)低于對照組(P<0.05)。烏瓜配伍各劑量組與生川烏組雌性大鼠臟器指數(shù)比較差異無顯著意義(P>0.05)。生川烏組及烏瓜配伍各劑量組雄性大鼠的各臟器系數(shù)與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),烏瓜各劑量組與生川烏組雄性大鼠各臟器指數(shù)比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。停藥15d,生川烏組及烏瓜配伍各劑量組大鼠臟器系數(shù)與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
2.4.血液常規(guī)生川烏組及烏瓜配伍各劑量組雌
9、性大鼠的紅細胞數(shù)(RBC)高于對照組(P<0.05)。生川烏組與烏瓜配伍各劑量組雌性大鼠的血液學各項指標比較差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。生川烏組及烏瓜配伍各劑量組雄性大鼠的血液學各項指標與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),生川烏組與烏瓜配伍各劑量組雄性大鼠的血液學各項指標比較差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。停藥15d,生川烏組及烏瓜配伍各劑量組大鼠血液學各項指標與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
10、 2.5.血液生化學指標生川烏組大鼠(雌雄)血清AST、ALT及BUN水平高于對照組(P<0.05)。
烏瓜配伍高劑量組大鼠(雌雄)血清AST、ALT、BUN、Cr、CK及LDH水平高于對照組(P<0.05-0.01);中劑量組雌性大鼠血清AST、ALT、LDH水平高于對照組(P<0.05),雄性大鼠血清AST、ALT、BUN水平高于對照組(P<0.05);低劑量組雄性大鼠血清AST、ALT及BUN水平高于對照組(氏
11、P<0.05)。
烏瓜配伍高劑量組雌性大鼠BUN、Cr、CK水平高于生川烏組(P<0.05)。烏瓜配伍各劑量組雄性大鼠各項指標與生川烏組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
停藥15d,烏瓜配伍高劑量組大鼠血清AST、ALT水平高于對照組(P<0.05),烏瓜配伍高劑量組其他血清生化指標與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),生川烏組及烏瓜配伍中、低劑量組其他血清生化指標與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義(
12、P>0.05)。
2.6.病理組織學烏瓜配伍高劑量組大鼠心、肝、腎等組織細胞出現(xiàn)細胞壞死、水腫及炎性細胞浸潤等病理改變。烏頭組及烏瓜配伍中、低劑量組大鼠主要臟器組織損傷較輕或無明顯損傷。停藥15d各劑量組大鼠主要臟器組織無明顯損傷。
結(jié)論:
1.生川烏配伍全瓜蔞急性毒性強于生川烏單行。
2.生川烏配伍全瓜蔞水浸劑長期給藥對大鼠心、肝、腎功能及組織學均有一定毒性,對大鼠體重增長率及血
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