PAI-1在LPS誘導(dǎo)的急性肺損傷中的作用和可能機(jī)制.pdf

1、目的:研究纖溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)在脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的急性肺損傷中的表達(dá)水平及可能的作用機(jī)制。
　　 方法:在體外實(shí)驗(yàn)中,采用LPS刺激肺上皮細(xì)胞系A(chǔ)549,分別在4小時(shí)、8小時(shí)、12小時(shí)和24小時(shí)各時(shí)間點(diǎn)觀察PAI-1和其他炎癥介導(dǎo)基因在mRNA水平的表達(dá)改變。另外,采用不同劑量的LPS刺激A549細(xì)胞,進(jìn)一步明確PAI-1與炎癥介質(zhì)LPS的劑量依賴性。在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中,給予野生型C57/BL6小鼠氣管內(nèi)滴注LP

2、S建立急性肺損傷的模型。通過ELISA測(cè)定了血漿中PAI-1的含量,并通過實(shí)時(shí)定量RT-PCR測(cè)定在各個(gè)時(shí)間點(diǎn),PAI-1和其他炎癥介導(dǎo)基因的表達(dá)改變譜,從而揭示PAI-1在急性肺損傷中的作用和可能的機(jī)制。
　　 結(jié)果:體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,A549細(xì)胞在LPS刺激后隨著時(shí)間的改變,PAI-1的表達(dá)水平顯著升高,在4小時(shí)其表達(dá)水平與生理鹽水對(duì)照組相比已達(dá)2.24倍,持續(xù)升高達(dá)12小時(shí),24小時(shí)時(shí)恢復(fù)正常;在給予LPS1mg/ul刺激

3、后12小時(shí),隨著LPS的劑量增加,1ug/ml、5ug/ml和10ug/ml,PAI-1、MMP2和PPAR-γ的表達(dá)呈劑量依賴性。氣管內(nèi)滴注5mg/kgLPS,成功建立了急性肺損傷模型。血漿中PAI-1在LPS刺激后4小時(shí)顯著升高,24小時(shí)后更加明顯。同樣,隨著時(shí)間的改變,肺內(nèi)PAI-1mRNA表達(dá)也隨之上調(diào),最高達(dá)28倍。同時(shí),MMP9、IL-1β和NF-κB的mRNA水平也明顯升高,而PPAR-γ和MMP2的表達(dá)水平反之下降。