促卵泡素與促黃體素對豬卵母細(xì)胞體外成熟的影響.pdf

1、本研究探討了促卵泡素(FSH)與促黃體素(LH)對豬卵母細(xì)胞體外成熟的影響。利用離體豬卵巢上采取的卵丘-卵母細(xì)胞復(fù)合物(COCs)，在含不同濃度促卵泡素(FSH)與促黃體素(LH)的成熟液中進(jìn)行體外培養(yǎng)，比較和分析各組成熟率的差異，并用免疫組化方法比較和分析了不同培養(yǎng)條件下COCs顆粒細(xì)胞上促卵泡素受體(FSHR)與促黃體素受體(LHR)的表達(dá)差異，從而找到FSH與LH的最佳劑量和作用時(shí)間，進(jìn)一步提高體外成熟的效率，結(jié)果如下：

2、1.FSH與LH在豬卵母細(xì)胞體外成熟過程中可發(fā)揮促進(jìn)作用。成熟液中單獨(dú)添加FSH時(shí)，其最佳濃度為10IU/ml；單獨(dú)添加LH時(shí)，其最佳濃度為1IU/ml；同時(shí)添加兩種激素時(shí)，二者最佳濃度均為1IU/ml。豬卵母細(xì)胞體外成熟培養(yǎng)時(shí)間建議以44～46小時(shí)為宜。 2.應(yīng)用免疫組化方法對FSHR與LHR進(jìn)行測定，方法準(zhǔn)確可行。在新鮮采集的細(xì)胞及培養(yǎng)結(jié)束后的細(xì)胞上，F(xiàn)SHR既存在于卵丘細(xì)胞上，又存在于卵母細(xì)胞上；而LHR僅存在于卵丘細(xì)胞上

3、。 3.成熟液中添加1IU/mlLH時(shí)，LHR數(shù)量最多，卵母細(xì)胞成熟率最高?？梢缘贸?，受體數(shù)量與成熟率間有一定聯(lián)系。在含有1IU/mlLH的成熟液中添加不同濃度的FSH時(shí)，對LHR的表達(dá)起到抑制作用。成熟液中添加FSH時(shí)，可促進(jìn)FSHR的表達(dá)，并且呈濃度依賴性。 4.促性腺激素受體的表達(dá)隨體外培養(yǎng)時(shí)間的變化而發(fā)生變化：在體外培養(yǎng)過程的Oh、12h、24h、36h、44h、48h六個(gè)不同時(shí)間段中，隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長，F(xiàn)SH