葉酸缺乏對孕鼠子宮蛻膜血管生成的影響及機制初探.pdf

1、目的：
　　葉酸是哺乳類動物生長發(fā)育過程中擔負一碳單位傳遞的B族維生素，在一碳單位代謝中發(fā)揮主要輔酶的作用。葉酸缺乏已被公認為是與胎兒神經(jīng)管缺陷發(fā)生緊密相關的一個重要危險因素。眾所周知，除胎兒自身的發(fā)育外，胚胎著床時母體子宮內(nèi)膜容受性的建立以及著床后子宮內(nèi)膜蛻膜化的正常維持均是保證胚胎得以正常發(fā)育的基本條件。目前關于葉酸缺乏是如何導致胎兒出生缺陷的機理探索主要集中在胎兒的自身發(fā)育上，從母體的角度探尋其發(fā)生機制的研究仍然較少。課題組

2、前期研究發(fā)現(xiàn)葉酸缺乏情況下子宮內(nèi)膜容受性的建立并無顯著異常，但孕鼠最終妊娠結(jié)局不良。葉酸缺乏是否會影響著床后的子宮內(nèi)膜蛻膜化等妊娠進程，特別是子宮蛻膜血管網(wǎng)絡的建立這一確保胚胎成功發(fā)育的重要分子事件，值得課題組關注和追蹤。因此，本研究利用葉酸缺乏的孕鼠模型旨在探討葉酸缺乏對子宮內(nèi)膜蛻膜血管生成的影響及其可能的分子機制，為全面深入闡釋母體葉酸缺乏導致胎兒出生缺陷的分子機制提供更多的實驗證據(jù)。
　　方法：
　　（1）構建葉酸缺乏

3、的孕鼠模型，采用電化學發(fā)光法檢測小鼠血清葉酸水平。
　?。?）采用H&E染色及CD34免疫組化染色檢測孕鼠蛻膜血管生成的狀況。
　?。?）利用Real-time PCR、Western-blot及免疫組化染色方法分析血管生成相關因子VEGFA、VEGFR2和 PLGF的表達水平。
　?。?）采用ELISA方法檢測并分析孕鼠血清中葉酸代謝產(chǎn)物Hcy及生殖相關激素 FSH、 LH、 PRL、 P4和 E2的變化情況。

4、>　?。?）利用WB檢測蛻膜組織中ERα及PR蛋白水平。
　　結(jié)果：
　?。?）葉酸缺乏孕鼠血清葉酸水平顯著低于正常組，表明模型構建成功。
　　（2）葉酸缺乏對子宮內(nèi)膜蛻膜血管生成的影響，主要表現(xiàn)為血管密度的降低和血管竇的擴增及延伸的異常。
　　（3）葉酸缺乏孕鼠蛻膜組織中的VEGFA、VEGFR2和PLGF的表達降低。
　?。?）葉酸缺乏孕鼠的血清Hcy水平顯著升高。
　?。?）葉酸缺乏孕鼠的血清生