肝素抑制LPS誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞ICAM-1的表達(dá).pdf

1、目的：探討普通肝素(UFH)是否抑制脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)細(xì)胞間黏附分子-1(ICAM-1)的表達(dá)。
　　方法：體外培養(yǎng)HUVECs傳代至第4～5代用于實(shí)驗(yàn)。將傳代后的細(xì)胞隨機(jī)分為4組:正常對(duì)照組;LPS刺激組（LPS10μg/ml）;普通肝素(UFH)+LPS組(UFH10 U/ml+LPS10μg/ml);普通肝素組(UFH10 U/ml)。普通肝素+LPS組于LPS刺激前15min加入10 U

2、/ml的普通肝素，后加入LPS對(duì)HUVECs進(jìn)行刺激。各組分別于LPS刺激后的6h及12h收集HUVECs并提取各自細(xì)胞組的總RNA，將所提取的總RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA后，應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(real-timequantative polymerase chain reaction，qRT-PCR)的方法檢測(cè)各組細(xì)胞中ICAM-1mRNA的水平變化，并依據(jù)數(shù)據(jù)結(jié)果進(jìn)行組間比較分析。
　　結(jié)果：與正常對(duì)組相比較，L

3、PS刺激組ICAM-1 mRNA的表達(dá)水平明顯增加，6h達(dá)到高峰，12h其表達(dá)呈現(xiàn)下降趨勢(shì)(6h:15.91±1.64比7.59±0.93;12h:12.00±0.51比6.59±0.29)。與LPS組相比較，普通肝素預(yù)處理組明顯降低6h及12hICAM-1 mRNA的表達(dá)水平（6h:10.59±1.24比15.91±1.64，12h:8.05±0.89比12.00±0.51）。差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。與正常對(duì)照組相比較，普

4、通肝素組ICAM-1 mRNA的表達(dá)水平無明顯變化(6h:7.72±0.89比7.59±0.93;12h:5.74±1.38比6.59±0.29)。差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　結(jié)論：脂多糖刺激下HUVECs表達(dá)ICAM-Ⅰ mRNA的水平明顯增加，6h達(dá)到高峰之后呈逐漸下降趨勢(shì)。普通肝素降低了LPS刺激下HUVECs表達(dá)ICAM-ⅠmRNA的水平，提示肝素抑制LPS誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞ICAM-1表達(dá)，對(duì)LPS刺激的