抑肽酶抑制凝血酶誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞IL-8表達.pdf

1、目的：研究抑肽酶對凝血酶誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVECs）IL-8表達和核因子κB（NF-κB）活性的影響。 方法：將培養(yǎng)的HUVECs分為空白對照組、凝血酶組、以及800KIU/ml（半量）和1600KIU/ml（全量）抑肽酶組預(yù)處理1h，然后以凝血酶（4U/ml）誘導(dǎo)刺激作用。ELISA測定細(xì)胞培養(yǎng)上清液中IL-8含量；熒光實時定量PCR檢測IL-8mRNA表達，擴增產(chǎn)物進行熔解曲線圖和瓊脂糖電泳分析；采用激光共聚焦顯微

2、鏡觀察NF-κBp65在細(xì)胞胞質(zhì)和胞核的分布情況。 結(jié)果：⑴凝血酶明顯刺激HUVECs分泌IL-8和IL-8mRNA表達，細(xì)胞中游離的NF-κB增加并促進其核轉(zhuǎn)位（P<0.01，P<0.01）。 ⑵半量和全量抑肽酶均能減少凝血酶誘導(dǎo)HUVECs IL-8的分泌和IL-8 mRNA的表達(P<0.01，P<0.01)，且對細(xì)胞內(nèi)游離的NF-κB產(chǎn)生和核轉(zhuǎn)位具有明顯抑制作用(P<0.01，P<0.01)，兩抑肽酶組間的抑制作