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文檔簡介
1、目的:研究辛伐他汀對神經(jīng)源性肺水腫(neurogenic pulmonary edema,NPE)大鼠血清孵育的人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞(Human pulmonary microvascular endothelial cell,HPMEC)凋亡的影響,并探討其可能的機(jī)制。
方法:健康的雄性SD大鼠50只,體重250-300g,參考Ishikawa N和Hamdy O建立大鼠NPE模型,收集NPE大鼠的血清備用。將在體外培養(yǎng)的HP
2、MEC,隨機(jī)地分為3組,分別為對照組,NPE組,辛伐他汀組,每組6個(gè)樣本,培養(yǎng)24h后收集細(xì)胞進(jìn)行以下檢測:MTT法檢測各組HPMEC的細(xì)胞毒性;流式細(xì)胞儀檢測各組HPMEC的凋亡率;RT-PCR檢測各組HPMEC Bcl-2 mRNA和Bax mRNA的表達(dá)水平;WB檢測各組HPMEC Bcl-2蛋白和Bax蛋白的表達(dá)水平。
結(jié)果:
MTT:與NPE組相比,辛伐他汀組細(xì)胞培養(yǎng)24h及48h后活性明顯升高(P<0.0
3、1)。
流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果:對照組各樣本 HPMEC平均凋亡率為4.28%,NPE組各樣本HPMEC平均凋亡率為35.96%,辛伐他汀組各樣本HPMEC平均凋亡率為16.98%;與對照組比較,NPE組、辛伐他汀組細(xì)胞凋亡率明顯增加(P<0.01);與 NPE組比較,辛伐他汀組細(xì)胞凋亡率明顯下降(P<0.01)。
RT-PCR:與對照組相比,NPE組及辛伐他汀組,Bcl-2 mRNA、Bax mRNA均高表達(dá)(P<0.
4、01);與NPE組相比,辛伐他汀組Bcl-2 mRNA高表達(dá)(P<0.01),Bax mRNA低表達(dá)(P<0.01)。
WB:與對照組相比,NPE組、辛伐他汀組,Bcl-2、Bax蛋白均高表達(dá)(P<0.01);與NPE組相比,辛伐他汀組Bcl-2 mRNA高表達(dá)(P<0.01),Bax mRNA低表達(dá)(P<0.05)。
結(jié)論:辛伐他汀可抑制NPE大鼠血清孵育的HPMEC的凋亡,其機(jī)制之一可能與其上調(diào)Bcl-2表達(dá),下
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