2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、目的:研究血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2 (angiotensin converting enzyme-2,ACE2)在大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞 (rat pulmonary microvascular endothelial cell,RPMVEC)上的表達(dá),觀察脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)對(duì)RPMVEC的損傷作用及ACE2表達(dá)的影響。 方法:采用RT-PCR、Westem blot和免疫組化方法,檢測(cè)體外培養(yǎng)的RP

2、MVEC是否表達(dá) ACE2;引入內(nèi)參半定量分析10μg/ml的LPS孵育RPMVEC后不同時(shí)相點(diǎn)ACE2表達(dá)的變化;用MTT比色法測(cè)定不同劑量LPS(0.1μg/ml-100μg/ml) 作用后RPMVEC在540nm處的吸光度,以反映細(xì)胞存活率和代謝活性的變化。 結(jié)果:1.體外成功分離培養(yǎng)出RPMVEC,并經(jīng)形態(tài)學(xué)及FITC-BSI結(jié)合實(shí)驗(yàn)證實(shí)。2.RT-PCR法從細(xì)胞總RNA中擴(kuò)增出ACE2的特異性條帶,Western bl

3、ot法在細(xì)胞蛋白提取液中檢測(cè)出ACE2的蛋白印跡條帶,免疫組化實(shí)驗(yàn)表明ACE2免疫組化反應(yīng)產(chǎn)物主要位于RPMVEC的胞膜和胞漿。3.以 10μg/ml的LPS處理RPMVEC后,用RT-PCR及Western blot法檢測(cè)ACE2的變化,在3h、12h、24h時(shí)相點(diǎn),ACE2 mRNA和蛋白的表達(dá)量均明顯低于對(duì)照組。4.MTT比色實(shí)驗(yàn)表明,0.1μg/ml-100μg/ml濃度的LPS作用RPMVEC后,細(xì)胞存活率和代謝活性顯著降低,

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