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文檔簡介
1、目的:分析GM130在不同分化人胃癌細(xì)胞系的差異表達(dá),利用小干擾RNA技術(shù)來沉默GM130基因,研究其對(duì)胃癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。
方法:體外培養(yǎng)三株不同分化程度胃癌細(xì)胞系(高分化MKN-28、中分化SGC-7901、低分化MKN-45)Western Blot和RT-PCR篩選出高表達(dá)GM130的細(xì)胞株MKN-45、SGC-7901,設(shè)計(jì)并化學(xué)合成、轉(zhuǎn)染、篩選出針對(duì)GM130的小干擾RNA片段。通過MTT、Transwell
2、、Matrigel侵襲實(shí)驗(yàn),觀測(cè)下調(diào)GM130后對(duì)胃癌細(xì)胞株的生物學(xué)行為影響,Western blot檢測(cè)細(xì)胞中MMP-2、MMP-9蛋白的變化。
結(jié)果:Western Blot和RT-PCR檢測(cè)GM130在MKN-45、SGC-7901細(xì)胞中呈現(xiàn)高表達(dá)。Western Blot和qRT-PCR顯示在低分化胃癌MKN-45細(xì)胞中,GM130-siRNA-519轉(zhuǎn)染組GM130基因的表達(dá)水平顯著抑制(P﹤0.05)。與對(duì)照組相比
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