CDX2調(diào)控miRNA-32表達(dá)影響胃癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲作用及機(jī)制的初步研究.pdf

1、學(xué)校代碼：10285學(xué)號(hào)：20134132103博士學(xué)位論文（專業(yè)學(xué)位）CDX2調(diào)控miRNA32表達(dá)影響胃癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲作用及機(jī)制的初步研究ThepreliminarystudyoftheeffectmechanismofCDX2modulatesgastriccancercellproliferationmotilityinvasivenessbydirectlytargetingmiRNA32研究生姓名張健鋒指導(dǎo)教師姓名陳

2、衛(wèi)昌專業(yè)名稱內(nèi)科學(xué)（消化病學(xué)）研究方向消化道腫瘤基礎(chǔ)與臨床研究所在院部蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院論文提交日期2016年3月CDX2調(diào)控miRNA32表達(dá)影響胃癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲作用及機(jī)制的初步研究中文摘要ICDX2調(diào)控miRNA32表達(dá)影響胃癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲作用及機(jī)制的初步研究中文摘要背景和目的：背景和目的：胃癌是我國(guó)高發(fā)的惡性腫瘤之一，胃癌的轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致病人預(yù)后不良和生存率差的主要因素，越來越多的證據(jù)表明，胃癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移與上皮間質(zhì)

3、轉(zhuǎn)化（EMT）密切相關(guān)。尾型同源盒轉(zhuǎn)錄因子2（CDX2）在決定胃上皮干細(xì)胞的分化進(jìn)程中發(fā)揮至關(guān)重要的角色，CDX2表達(dá)陽性的胃癌術(shù)后生存率明顯高于CDX2表達(dá)陰性患者，提示CDX2是胃上皮細(xì)胞分化和抑制胃癌發(fā)生的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子。我們預(yù)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)胃癌細(xì)胞上調(diào)CDX2表達(dá)后，應(yīng)用miRNA芯片檢測(cè)差異表達(dá)的miRNA，結(jié)果顯示，miRNA32上調(diào)倍數(shù)較高。有文獻(xiàn)報(bào)道，miRNA32在肺癌和口腔癌中起著抗癌基因的作用。我們的研究也發(fā)現(xiàn)上調(diào)miRN

4、A32表達(dá)可明顯抑制人胃癌細(xì)胞SGC7901的生長(zhǎng)及侵襲能力。然而，CDX2是否直接調(diào)控miRNA32表達(dá)而抑制胃癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲能力？這一作用是否與胃癌細(xì)胞EMT有關(guān)？目前鮮有文獻(xiàn)報(bào)道。本研究首先在胃癌患者術(shù)后組織標(biāo)本中探討CDX2和miRNA32的表達(dá)與病人臨床病理特征及其與胃癌患者預(yù)后的關(guān)系。隨后，通過過表達(dá)或干擾表達(dá)CDX2后檢測(cè)胃癌細(xì)胞中CDX2與miRNA32表達(dá)的時(shí)效關(guān)系，探討CDX2調(diào)控miRNA32表達(dá)后對(duì)胃癌細(xì)

5、胞增殖、遷移和侵襲等惡性行為及EMT表型的影響。最后，在裸鼠皮下胃癌移植瘤模型中進(jìn)一步驗(yàn)證CDX2調(diào)控miRNA32表達(dá)對(duì)人胃癌裸鼠皮下移植瘤的影響及其對(duì)EMT的作用。方法：方法：1.免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)60例胃癌患者術(shù)后石蠟切片標(biāo)本中CDX2蛋白的表達(dá)，分析其與臨床病理特征的關(guān)系，隨訪患者生存資料，分析CDX2表達(dá)對(duì)患者術(shù)后復(fù)發(fā)和生存期等預(yù)后的影響；應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量（RT）PCR檢測(cè)50例胃癌患者術(shù)后新鮮冰凍組織中CDX2mRNA和m