PCV2對(duì)體外培養(yǎng)豬肺泡巨噬細(xì)胞TLRs的影響.pdf

1、PCV2是斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征(PMWS)的主要病原，傳播性廣泛，導(dǎo)致的經(jīng)濟(jì)損失巨大。PCV2感染后，可引起仔豬嚴(yán)重的免疫抑制。Toll樣受體(TLR)可識(shí)別一種或多種病原相關(guān)分子模式（PAMP），能連接適應(yīng)性免疫和先天性免疫。PCV2在幼豬體內(nèi)主要侵襲巨噬細(xì)胞，它是病毒增殖和傳播的關(guān)鍵細(xì)胞;同時(shí)巨噬細(xì)胞具有強(qiáng)大的吞噬功能，在固有免疫中發(fā)揮重要的作用;肺臟是PCV2感染后損傷的主要器官，因此，對(duì)PCV2感染豬肺泡巨噬細(xì)胞（PAMs）

2、后TLRs變化的研究，有利于揭示PCV2引起免疫抑制的機(jī)制。
　　選用12頭豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)和豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)血清抗體和抗原均為陰性的普通斷奶仔豬，無(wú)菌分離PAMs，分為對(duì)照組和PCV2感染組（PCV2組）進(jìn)行體外培養(yǎng)，分別在培養(yǎng)0、6、12、24和48 h收集PAMs。采用間接免疫熒光法檢測(cè)PCV2感染PAMs情況;熒光定量PCR法檢測(cè)TLR2、TLR3、TLR4、TLR7、TLR8和TLR9 mR

3、NA表達(dá)情況。Western blot方法檢測(cè)TLR3、TLR4和TLR9蛋白的表達(dá)。結(jié)果表明，TLR2 mRNA的表達(dá)量在感染后6h迅速升高，12 h后又迅速下降，但仍顯著高于對(duì)照組（P＜0.01或P＜0.05），到48 h時(shí)恢復(fù);TLR3 mRNA的表達(dá)量，攻毒后6h和12h顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，24h乖48 h時(shí)恢復(fù)到對(duì)照組水平;PCV2明顯升高感染后12h PAMs中TLR4 mRNA的表達(dá)（P＜0.05），而明顯抑制

4、感染后24 h和48 h的表達(dá)（P＜0.05）;PCV2引起感染后6h和12 h的PAMs對(duì)TLR7、TLR8和TLR9mRNA的表達(dá)量顯著升高（P＜0.01或P＜0.05），而到感染后24 h和48 h又恢復(fù)到對(duì)照組水平。結(jié)果表明，PCV2可顯著影響體外培養(yǎng)PAMs TLR2、TLR3、TLR4、TLR7、TLR8和TLR9 mRNA的表達(dá)。
　　PCV2孵育后12h，PAMs中TLR3蛋白含量明顯上調(diào)，與同時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組相比顯著