芹菜素對(duì)大鼠心肌缺血再灌注細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用.pdf

1、目的：探討黃酮類化合物芹菜素對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性心肌缺血再灌注(ischemia/reperfusion, I/R)時(shí)心肌細(xì)胞凋亡與Bcl-2、Bax和Caspase-3表達(dá)的影響，并分析其對(duì)心肌損傷的保護(hù)作用。
　　 方法：采用結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前降支，心肌缺血45 min，再灌注2 h制作缺血再灌注模型。將大鼠隨機(jī)分為八組，即正常組（the normAlgroup, Normal）、假手術(shù)組（sham operation group,

2、Sham）、生理鹽水缺血再灌注組(physiologicAlsaline ischemia-reperfusion group, NS)、溶劑對(duì)照組(solvent control group, Sol)、美托洛爾對(duì)照組（metoprolol control group, Meto）、芹菜素低、中、高劑量（1mg·kg-1、2 mg·kg-1、4 mg·kg-1）用藥組(apigenin low, medium and high dos

3、e treatment group, Api1、Api2、Api4)。同時(shí)觀察大鼠再灌注心律失常持續(xù)時(shí)間和再灌注心律失常評(píng)分。再灌注2 h后，采用化學(xué)法測(cè)定一氧化氮(nitric oxide，NO)含量，用721分光光度計(jì)測(cè)定一氧化氮合酶(nitric oxide synthase, NOS)活力；用1％Evean Blue和2,3,5-三苯基氯化四氮(2,3,5-tri phenyltetrazolium chloride, TTC)

4、染色法測(cè)定心肌損傷面積和梗死面積；采用TUNEL法檢測(cè)原位標(biāo)記凋亡心肌細(xì)胞；免疫組化法測(cè)Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表達(dá)；病理組織切片檢查心肌損傷情況;采用RT-PCR法測(cè)Bcl-2和Bax基因的mRNA表達(dá)。
　　 結(jié)果：⑴芹菜素各劑量組血清樣品中NO含量均顯著高于NS組（P<0.05），其中，Api4組的NO含量最高。⑵芹菜素各劑量組的心肌組織樣品中總NOS活力和cNOS活力顯著高于NS組（P＜0.05），其中

5、Api4組的總NOS活力和cNOS活力最高。iNOS活力在各組之間沒有差異，且iNOS活力比cNOS活力低的多。⑶芹菜素各劑量組與NS組比較，劑量依賴性地縮小大鼠缺血再灌注心肌梗死面積(P＜0.05)。⑷ Api4組和Meto組降低心律失常評(píng)分和縮短心律失常出現(xiàn)總持續(xù)時(shí)間，與NS組和Sol組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；NS組和Sol組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；Api4組和Meto組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。⑸芹菜

6、素各劑量組心肌細(xì)胞凋亡率明顯低于NS組（P＜0.05）；APi1、APi2、APi4能劑量依賴性地降低大鼠心肌缺血再灌注細(xì)胞凋亡率（P＜0.05）。⑹芹菜素各劑量組劑量依賴性地提高大鼠心肌缺血再灌注Bcl-2蛋白表達(dá)量（P＜0.05）、降低大鼠心肌缺血再灌注Bax和Caspase-3蛋白表達(dá)量（P＜0.05）。⑺芹菜素各劑量組與NS組比較，心肌組織損傷的病理學(xué)變化顯著減輕（P＜0.05）。⑻芹菜素各劑量組與NS組比較（P＜0.05），B

7、cl-2 mRNA表達(dá)量增加和Bax mRNA表達(dá)量減少均呈劑量依賴性。
　　 結(jié)論：
　　 ⑴芹菜素藥物預(yù)適應(yīng)對(duì)在體大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用可能與其影響NO產(chǎn)生有關(guān)。
　　 ⑵芹菜素具有縮短大鼠再灌注心律失常持續(xù)時(shí)間，降低再灌注心律失常評(píng)分和細(xì)胞凋亡率，縮小大鼠缺血再灌注心肌梗死面積，進(jìn)一步證明其對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷具有保護(hù)作用。
　　 ⑶芹菜素抗大鼠心肌缺血再灌注細(xì)胞凋亡機(jī)制可能與其下調(diào)心