黃芩與黨參多糖的提取及其體外抗NDV活性研究.pdf

1、新城疫是由NDV引起的一種急性、敗血性、高度傳染性疾病,死亡率極高,對我國養(yǎng)禽業(yè)危害性極大。防治NDV的措施主要靠疫苗接種,特別是弱毒疫苗的應(yīng)用,目前缺乏有效的治療藥物?？共《疚魉庨L期應(yīng)用易產(chǎn)生耐藥性,降低療效,病情復(fù)發(fā),成為臨床治療及新藥開發(fā)的重要問題,而中藥在防治病毒感染性疾病方面更具有獨特的優(yōu)勢和廣闊的發(fā)展前景。
　　 本試驗在前期初步篩選的具有抗新城疫病毒活性中藥基礎(chǔ)上,以黃芩多糖(SBGP)和黨參多糖(CPP)為研究對

2、象,開展了如下研究內(nèi)容:
　　 本課題采用水提醇沉法提取黃芩及黨參粗多糖,在單因素考察基礎(chǔ)上通過正交實驗確定兩種多糖提取的最佳條件。黃芩多糖優(yōu)化的提取條件為:即料液比為1:20,提取時間為60min,溶劑濃度為85％,提取溫度為60"C,該條件下黃芩多糖提取率最好,為19.77％,通過苯酚-硫酸法測定多糖含量為0.71％。黨參多糖優(yōu)化的提取條件為:即料液比為1:20,提取時間為100min,溶劑濃度為85％,提取溫度為40℃,該

3、條件下黨參多糖的提取率最高,為29.03％,并通過苯酚-硫酸法測定多糖含量為2.87％。通過Sevag法除去蛋白、真空干燥法將提取物烘干、透析法除去小分子物質(zhì)及無機物等手段純化多糖提取物以后,采用體外細胞培養(yǎng)法評價了兩種多糖提取物抗新城疫病毒活性。結(jié)果顯示:先加多糖后加病毒時黃芩多糖及黨參多糖濃度為125μg·mL-1和62.5μg·mL-1時,具有顯著的抗病毒活性,多糖濃度為31.25·μg·mL-1及15.63μg·mL-1時,可以

4、判定其具有一定的抗病毒活性,多糖濃度為7.81μg·mL-1時,可以判定為無抗病毒活性,黃芩多糖及黨參多糖的治療指數(shù)(TI)均為8;先加病毒后加多糖時黃芩多糖及黨參多糖濃度為125μg·mL-1和62.5μg·mL-1時,具有顯著的抗病毒活性,黃芩多糖濃度為31.25μg·mL-1及15.63μ·mL-1時,可以判定其具有一定的抗病毒活性,黃芩多糖濃度為7.81μg·mL-1時,可以判定為無抗病毒活性,黃芩多糖TI為8。但是,黨參多糖在

5、31.25μg·mL-1可以判定其具有一定的抗病毒活性,在15.63μg·mL-1和7.81μg·mL-1時無抗病毒活性,黨參多糖的TI為4;病毒及多糖同時加入時黃芩多糖濃度為125μg·mL-1和62.5μg·mL-1時具有一定的抗病毒活性,其他濃度時則無抗病毒活性,黃芩多糖的TI為2,這表明黃芩多糖直接殺滅NDV的作用較弱:黨參多糖各濃度均無抗病毒活性。
　　 通過以上研究,優(yōu)化了黃芩多糖及黨參多糖的提取條件,確定了兩種多糖