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1、忽地笑(Lycoris aurea(L’Her.) Herb.)是一種多年生草本植物,具有很高的藥用和觀賞價(jià)值。但國(guó)內(nèi)外目前對(duì)忽地笑研究重點(diǎn)主要是生物堿,多糖結(jié)構(gòu)和生物活性研究較少。本課題主要進(jìn)行了忽地笑多糖的提取純化及體外抗氧化活性研究。
?。?)建立蒽酮-硫酸法檢測(cè)忽地笑多糖含量。用紫外分光光度計(jì)(UV)800~400 nm掃描確定最大吸收波長(zhǎng)(λmax)=625 nm,線性回歸方程為y=8.878x+0.015, R2=0
2、.9990,檢測(cè)范圍為0.01~0.1 mg/mL;方法學(xué)考察表明精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性和加樣回收率良好。
?。?)采用響應(yīng)面優(yōu)化分析水和超聲波輔助提取忽地笑多糖工藝參數(shù)。水提取法最佳工藝:在液料比23:1(mL:g),提取溫度70℃條件下提取7.7 h,多糖得率為42.00%;超聲波輔助提取最佳工藝:在液料比22:1(mL:g)下超聲處理15 min,然后在84℃提取6.9 h,多糖得率為40.95%。
?。?)忽地笑
3、多糖的純化研究。采用732型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂脫色結(jié)果表明:在樹(shù)脂用量10%,pH為4,溫度30℃的條件下脫色2 h,脫色率為65.76%,多糖保留率可達(dá)98.61%。Sevage法除蛋白7次時(shí),蛋白質(zhì)除去率為94.89%,多糖保留率達(dá)到78.57%。初步純化后的多糖經(jīng)DEAE-52纖維素柱層析,以0、0.1、0.3、0.5 mol/L的NaCl溶液梯度洗脫,得PBL1-1、PBL1-2、PBL1-3和PBL1-4四個(gè)多糖組分。
4、(4)采用凝膠排阻色譜-多角度激光光散射-示差檢測(cè)法(GPC-MALLS-RI)、高效液相色譜法(HPLC)、紅外光譜法(IR)和紫外分光光度法(UV)對(duì)PBL1-1、PBL1-2、PBL1-3的結(jié)構(gòu)進(jìn)行初步研究。結(jié)果表明:PBL1-1重均分子量(Mw)為3.642×103 g/mol,PBL1-2重均分子量(Mw)為1.206×104 g/mol,PBL1-3重均分子量(Mw)為3.992×105 g/mol;PBL1-1由D-甘露糖
5、、D-無(wú)水葡萄糖、D-半乳糖組成,其摩爾比為1:0.34:0.036。PBL1-2由 D-甘露糖、鼠李糖、D-半乳糖醛酸、D-無(wú)水葡萄糖、D-半乳糖、阿拉伯糖組成,其摩爾比1:0.29:0.78:21.89:2.69:0.63。PBL1-3由 D-甘露糖、鼠李糖、D-葡萄糖醛酸、D-半乳糖醛酸、D-無(wú)水葡萄糖、D-半乳糖、阿拉伯糖組成,其摩爾比為1:2.63:0.47:1.63:0.83:6.92:1.34。IR檢測(cè)表明PBL1-1、P
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