版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、目的:通過研究QDPR基因過表達(dá)、敲低及K93T突變對(duì)高糖環(huán)境下腎小管上皮細(xì)胞TGF-β1、CTGF、VEGF蛋白含量的影響,探討QDPR基因活性改變在DN發(fā)生發(fā)展中的作用及其機(jī)制。
方法:western blot方法檢測QDPR蛋白在大鼠肝、腦、腎皮質(zhì)、腎髓質(zhì)中的表達(dá)情況。免疫組化方法檢測QDPR蛋白在大鼠和人腎臟中的定位情況。用慢病毒感染腎小管上皮細(xì)胞系NRK-52E,制作QDPR過表達(dá)、敲低及K93T細(xì)胞模型?;诖四P?/p>
2、,研究高糖環(huán)境下(30mmol/L)QDPR基因改變對(duì)TGF-β1、CTGF、VEGF蛋白含量的影響,實(shí)驗(yàn)采取以下分組:1 NRK-52E對(duì)照組(NRK-52E Control,NC)2 NRK-52E高糖組(NRK-52E exposed to High glucose,NHG)3空載過表達(dá)病毒對(duì)照組(overexpression lentivirus control,LV-OCON)4空載過表達(dá)病毒高糖組(overexpressio
3、n lentivirus control exposed to High glucose,LV-OCON-HG)5 QDPR基因過表達(dá)組(lentivirus overexpressed QDPR,LV-QDPR)6 QDPR基因過表達(dá)高糖組(lentivirus overexpressed QDPR exposed to High glucose,LV-QDPR-HG)7 QDPR蛋白 K93T突變組(lentivirus overe
4、xpressed K93T QDPR,K93T-QDPR)8 K93T突變過表達(dá)高糖環(huán)境組(lentivirus overexpressed K93T QDPR exposed to High glucose,K93T-QDPR-HG)9敲低對(duì)照組(LV-SHCON)10敲低對(duì)照高糖組(LV-SHCON-HG)11 QDPR基因敲低組(LV-SHQDPR)12 QDPR基因敲低對(duì)照組(LV-SHQDPR-HG)。每組細(xì)胞重復(fù)3皿,測定高
5、糖環(huán)境下QDPR及K93T突變對(duì)其酶活性的影響;對(duì)各組用western-blot法檢測高糖環(huán)境下QDPR表達(dá)改變及K93T突變對(duì)TGF-β1、CTGF和VEGF蛋白含量的影響。
結(jié)果:1 QDPR蛋白在大鼠肝、腦、腎皮質(zhì)、腎髓質(zhì)中高表達(dá),胰腺中等量表達(dá)。QDPR蛋白在大鼠和人的腎臟,腎小管,尤其是近曲小管上皮細(xì)胞高表達(dá)。2通過慢病毒轉(zhuǎn)染成功構(gòu)建了QDPR基因過表達(dá)、敲低及K93T突變腎小管上皮細(xì)胞模型。3正常糖環(huán)境下 K93T
6、-QDPR組 QDPR酶活性低于LV-QDPR組(P<0.05),高糖環(huán)境下LV-QDPR-HG組酶活性低于LV-QDPR組(P<0.05)。4高糖環(huán)境下NHG組TGF-β1蛋白含量高于NC組(P<0.01)。正常糖環(huán)境下空載病毒LV-OCON組TGF-β1表達(dá)水平無明顯改變;而高糖環(huán)境對(duì)TGF-β1含量影響不明顯。過表達(dá)QDPR基因LV-QDPR組與LV-OCON組相比TGF-β1蛋白含量增高(P<0.05);而高糖環(huán)境下LV-QDP
7、R-HG與LV-QDPR組相比TGF-β1表達(dá)量顯著增高(P<0.01),與LV-OCON-HG組相比顯著增高(P<0.001)。正常糖環(huán)境下敲低對(duì)照組LV-SHCON與NC組相比TGF-β1表達(dá)量降低;而高糖環(huán)境下TGF-β1表達(dá)量無明顯變化。敲低QDPR基因組LV-SHQDPR在正常和高糖環(huán)境下對(duì)TGF-β1表達(dá)量無明顯影響。正常糖環(huán)境下K93T突變組與LV-QDPR組相比TGF-β1含量降低,在高糖環(huán)境下能使TGF-β1表達(dá)量增高
8、,但低于LV-QDPR-HG組(P<0.05)。5高糖環(huán)境下NHG組CTGF蛋白含量高于NC組(P<0.05)。正常糖環(huán)境下空載病毒LV-OCON組與NC組相比CTGF表達(dá)含量無明顯改變;而高糖環(huán)境下CTGF無明顯改變。正常糖環(huán)境下過表達(dá)QDPR基因LV-QDPR組與LV-OCON組相比CTGF表達(dá)含量無明顯改變;而高糖環(huán)境下CTGF表達(dá)量與LV-QDPR組相比增高(P<0.01),與LV-OCON-HG組相比顯著增高(P<0.01)。
9、正常糖環(huán)境下敲低對(duì)照組LV-SHCON與NC組相比CTGF表達(dá)量有降低的趨勢;而高糖環(huán)境下LV-SHQDPR組CTGF表達(dá)量無明顯改變。正常糖環(huán)境下K93T突變與LV-QDPR組相比CTGF表達(dá)含量增高(P<0.05);而高糖環(huán)境能使CTGF表達(dá)量增高,但低于LV-QDPR-HG組(P<0.05)。6高糖環(huán)境下NHG組VEGF蛋白含量低于NC組(P<0.05)??蛰d病毒LV-OCON組與NC組相比VEGF水平增高;高糖環(huán)境下與NHG相比
10、VEGF水平增高(P<0.05)。正常糖環(huán)境下過表達(dá)QDPR基因LV-QDPR組與LV-OCON組相比VEGF蛋白含量無明顯改變;高糖環(huán)境下VEGF表達(dá)量與LV-QDPR組相比降低(P<0.05),也顯著低于LV-OCON-HG組(P<0.05)。正常糖環(huán)境下敲低對(duì)照組LV-SHCON組與NC組相比VEGF表達(dá)量增高(P<0.05);而高糖環(huán)境下 VEGF表達(dá)量顯著降低(P<0.01)。敲低QDPR基因組LV-SHQDPR與LV-SHC
11、ON組相比VEGF表達(dá)量降低(P<0.01);而高糖環(huán)境能使VEGF有減少的趨勢。在正常糖環(huán)境下K93T突變組與LV-OCON、LV-QDPR組相比VEGF表達(dá)量變化不大;而在高糖環(huán)境下能使VEGF表達(dá)量降低,但高于LV-QDPR-HG組(P<0.05)。
結(jié)論:1 QDPR基因能影響TGF-β1、CTGF及VEGF蛋白含量,提示過表達(dá)QDPR基因在一定程度上促進(jìn)DN的發(fā)生發(fā)展。2敲低QDPR基因及K93T突變導(dǎo)致QDPR酶活
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 大黃酸對(duì)高糖環(huán)境下腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的影響.pdf
- 黃芩苷對(duì)高糖環(huán)境下人腎小管上皮細(xì)胞凋亡的影響.pdf
- 高糖環(huán)境中腎小管上皮細(xì)胞c-met的表達(dá)及意義.pdf
- 高糖對(duì)腎小管上皮細(xì)胞表達(dá)RANTES、TGF-β的影響及霉酚酸干預(yù)研究.pdf
- 肝細(xì)胞生長因子對(duì)高糖環(huán)境下腎小管上皮細(xì)胞增殖及TGF-β-,1-表達(dá)的影響.pdf
- 高糖誘導(dǎo)人腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化及ILK的表達(dá).pdf
- 波動(dòng)性高糖誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞凋亡及其機(jī)制研究.pdf
- FoxO1對(duì)高糖誘導(dǎo)下腎小管上皮細(xì)胞線粒體自噬的影響及機(jī)制研究.pdf
- 益腎膠囊對(duì)高糖環(huán)境下大鼠腎小管上皮細(xì)胞自噬功能的影響.pdf
- siRNA抑制CTGF表達(dá)對(duì)高糖誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞肥大和轉(zhuǎn)分化的影響及機(jī)制.pdf
- 高糖對(duì)腎小管上皮細(xì)胞線粒體自噬的作用和機(jī)制研究.pdf
- 脂聯(lián)素對(duì)高糖環(huán)境下人腎小管上皮細(xì)胞凋亡及纖維化的影響.pdf
- 紅細(xì)胞生成素對(duì)高糖誘導(dǎo)下腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的影響及其機(jī)制的研究.pdf
- 脂代謝紊亂對(duì)腎小管上皮細(xì)胞hUAT基因表達(dá)的影響.pdf
- BMP-7對(duì)高糖環(huán)境下腎小管上皮細(xì)胞Id2和E2A蛋白表達(dá)的影響.pdf
- 高糖對(duì)人腎小管上皮細(xì)胞骨橋蛋白及其受體表達(dá)的影響及霉酚酸的干預(yù)研究.pdf
- 高糖誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 還原型谷胱甘肽對(duì)高糖環(huán)境中人腎小管上皮細(xì)胞的保護(hù)作用研究.pdf
- 高糖培養(yǎng)下益腎膠囊對(duì)腎小管上皮細(xì)胞SOCS-3、TGF-β1表達(dá)的影響.pdf
- 脂聯(lián)素對(duì)高糖環(huán)境下人腎小管上皮細(xì)胞凋亡及氧化應(yīng)激水平的影響.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論