高糖培養(yǎng)下益腎膠囊對腎小管上皮細(xì)胞SOCS-3、TGF-β1表達(dá)的影響.pdf

1、目的：觀察高糖培養(yǎng)下益腎膠囊含藥血清對腎小管上皮細(xì)胞SOCS-3、TGF-β1表達(dá)的影響，進(jìn)一步探討益腎膠囊在防治糖尿病腎病的作用機(jī)制。
　　方法：體外培養(yǎng)大鼠腎小管上皮細(xì)胞，健康清潔級雄性SD大鼠40只，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，大鼠藥物灌胃后取血制備成含藥血清。按隨機(jī)數(shù)字法分為7組，其中10只體重、鼠齡、一般狀況相近的為正常對照組，余30只依次分為隨機(jī)分為：高糖組、小劑量益腎治療組(0.625g/kg/d)、中劑量益腎治療組(1.25

2、g/kg/d)、大劑量益腎治療組(2.5g/kg/d)及貝那普利治療組(30 mg/kg/d)。采用Western blot免疫印跡檢測大鼠腎小管上皮細(xì)胞SOCS-3及TGF-β1的表達(dá)；Real-time PCR（實時定量熒光PCR）檢測大鼠腎小管上皮細(xì)胞中SOCS-3mRNA的表達(dá)情況；免疫熒光化學(xué)染色法檢測各組大鼠腎小管上皮細(xì)胞SOCS-3及TGF-β1的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：Real-time PCR結(jié)果示：高糖刺激下大鼠

3、腎小管上皮細(xì)胞SOCS-3mRNA與正常組相比明顯增高（p<0.05）；同高糖組比較，在含藥血清干預(yù)下SOCS-3mRNA表達(dá)進(jìn)一步增多（p<0.05）；免疫熒光化學(xué)染色法及Western blot檢測結(jié)果均提示：與正常組比較下，高糖刺激下大鼠腎小管上皮細(xì)胞SOCS-3與TGF-β1二者蛋白表達(dá)量均明顯增高（p<0.05）；同高糖組比較，經(jīng)含藥血清干預(yù)后大鼠腎小管上皮細(xì)胞SOCS-3表達(dá)呈現(xiàn)進(jìn)一步增多，而大鼠腎小管上皮細(xì)胞TGF-β1表