白鶴芋花序體細胞胚胎發(fā)生及快繁技術研究.pdf

1、本研究以白鶴芋花序為外植體，開展花序體胚直接誘導和快繁技術的研究，觀察白鶴芋花序體細胞胚胎發(fā)生時期，篩選體細胞組培快繁的最佳培養(yǎng)方案。主要研究結果如下:
　　1.白鶴芋花序體細胞胚發(fā)生
　　(1)白鶴芋花序滅菌試驗，采用3個不同發(fā)育時期的白鶴芋花序作為試驗材料，用0.1％升汞溶液進行不同時間滅菌處理，篩選出不同發(fā)育時期花序最佳的滅菌時間。結果表明，盛花期的無菌花序獲得率最高為64.44％，最佳滅菌時間為10min。
　

2、　(2)白鶴芋花序體細胞胚誘導試驗，通過對6-BA、KT和NAA進行正交分析，篩選出最優(yōu)激素組合6-BA5.0 mg/L+KT1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L，通過極差分析比較各激素間的影響，6-BA對體胚誘導影響最顯著。采用二因素重復試驗對不同發(fā)育時期及取材部位體胚誘導進行研究，盛花期形態(tài)學下端的體胚誘導率最高。采用單因素3水平完全隨機試驗，探究光周期對體細胞胚誘導的影響，試驗結果表明，先黑暗培養(yǎng)15天后轉到光暗比為12∶12

3、，為白鶴芋花序體胚誘導的最佳培養(yǎng)條件。
　　2.白鶴芋快繁技術的研究
　　(1)體細胞胚增殖培養(yǎng)研究中，采用單因素試驗設計對最佳體胚增殖培養(yǎng)基進行篩選，確定6-BA5 mg/L+ZT0.3 mg/L+NAA0.2 mg/L為最優(yōu)白鶴芋花序體胚增殖培養(yǎng)基配方。采用單因素試驗設計，開展蔗糖和葡萄糖培養(yǎng)試驗，當蔗糖濃度為45g/L、葡萄糖濃度為30g/L時，體胚增殖達到最佳的效果。在繼代頻率影響研究中，繼代周期控制在30-40d體

4、胚的增殖效果最佳。
　　(2)花序體胚萌發(fā)培養(yǎng)研究，綜合比較激素、活性炭、蔗糖等因素，探討出最佳白鶴芋花序體胚萌發(fā)的培養(yǎng)方案。確定IBA0.1 mg/L+GA30.4 mg/L+蔗糖30g/L為最佳體胚萌發(fā)激素組合。添加6g/L活性炭，體胚萌發(fā)率可提高4.80％。
　　(3)植株再生轉化體系建立試驗，通過對6-BA、IBA和GA3正交分析，篩選出最佳的植株再生轉化培養(yǎng)基配方為6-BA0.5 mg/L+IBA0.1 mg/L+

5、GA30.5 mg/L，植株轉化率達88.56％，同時得到最優(yōu)芽繁殖激素組合6-BA1.0 mg/L+IBA0.2 mg/L+ GA30.3 mg/L，芽繁殖系數(shù)達到3.71。3.白鶴芋試管苗移栽及催花技術研究
　　試管苗煉苗試驗結果表明，煉苗6d后開蓋2d，移栽于穴盤并覆膜14d，白鶴芋試管苗成活率達94.44％。不同濃度GA3白鶴芋催花試驗，研究結果表明，當GA3濃度達到250mg/L時，白鶴芋催花效果最好，催花率達到66.6