化學發(fā)光原理及檢測項目

1、化學發(fā)光的臨床應用,,銷售部賀竹泉,,賀竹泉15927596796Zhuquan.he@siemens.com,由于化學反應（通常是氧化）產生電子能級處于激發(fā)態(tài)的物質，后者通過躍遷釋放能量產生光子，從而導致的發(fā)光現(xiàn)象。,化學發(fā)光（Chemiluminescence）,生物發(fā)光和化學發(fā)光均屬于冷光，即發(fā)光不是由于發(fā)光體溫度升高所至，發(fā)射波長也與其溫度無關,,,,,,,,,,,,單光子計數(shù)器是目前高靈敏度發(fā)光分析儀的核心部件,,

2、,,,,,,光電倍增管,,,,,,,,,,,,高壓,,高速放大器,高速比較器,高速分頻器,發(fā)光樣品產生光子,,,激發(fā)光陰極產生光電子,,,在陽極上形成較強信號,脈沖信號,相對發(fā)光單位數(shù)字脈沖(RLU),,,,,,,,在各打拿極之間得到能量和數(shù)目的倍增,,,,,,,,,,,,,,,,單光子計數(shù)式發(fā)光檢測儀,計算機,打印機,,,,發(fā)光儀控制模塊,,發(fā)光儀執(zhí)行模塊,控制器,,,,,,,,,程控高壓,計數(shù)/貯存器,單光子計數(shù)器,

3、,,,樣品運動/定位裝置,,程控自動門鎖及檢測裝置,,,,,,,,原位注射泵,按化學反應類型,化學發(fā)光的分類,酶促化學發(fā)光： 辣根過氧化物酶系統(tǒng) 堿性磷酸酶系統(tǒng) 黃嘌呤氧化酶系統(tǒng)非酶促化學發(fā)光： 吖啶酯系統(tǒng) 草酸酯系統(tǒng)

4、 三價鐵-魯米諾系統(tǒng),閃光（Flash）:,按發(fā)光持續(xù)時間,發(fā)光時間在數(shù)十分鐘以上，如： HRP-Luminol系統(tǒng) AP-AMPPD系統(tǒng) 黃嘌呤氧化酶系統(tǒng)無須原位進樣、 以速率法測量。,發(fā)光時間在數(shù)秒內，如吖啶酯以原位進樣(In Situ Injector) 和時間積分法測量,輝光（Glow）:,,,時間,發(fā)光信號,,,,,輝光坪區(qū),,,,速率法測量,,原位進樣,,,,,,,,,,,,,積分法測

5、量,閃光尖峰,,,,,,,,,,,,,,,,,,閃光與輝光及其測量方式的差別,光生物學檢測技術的優(yōu)越性,徹底消除了放射性危害無半衰期限制，試劑穩(wěn)定性和有效期大大延長容易實現(xiàn)連續(xù)、動態(tài)、重復測定,適合于復合標記系統(tǒng)進行多指標并行測定操作簡單，反應速度快，容易實現(xiàn)自動化靈敏度和線性范圍超過以往技術,幾種標記/檢測技術靈敏度的比較,酶標,熒光,放免,發(fā)光,靈敏度(mol/L),10-1810-1510-1210-9,幾種標

6、記/檢測技術線性范圍的比較,酶標,熒光,放免,發(fā)光,線性范圍,105104103102,化學發(fā)光的臨床應用,甲狀腺疾病生殖系統(tǒng)疾病代謝疾病貧血心臟疾病生長激素炎癥因子……,甲狀腺疾病,甲狀腺功能亢進 甲狀腺功能減退 甲狀腺炎 自身免疫性甲狀腺病 甲狀腺腺瘤 甲狀腺癌,TT3TT4FT3FT4TSHTgAbTPOAbTg,甲狀腺疾病對于全身器官有廣泛的影響,甲狀腺功能

7、診斷新戰(zhàn)略 (Caldwell 1985),甲狀腺功能檢查,TSH,降低,升高,正常,降低,降低,正常,升高,正常,FT4,FT4,FT3,正常,升高,甲亢,亞臨床甲亢,繼發(fā)甲減,正常,亞臨床甲減,原發(fā)甲減,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,抗甲狀腺球蛋白抗體（Thyroglobulin autibody TG-AG）,在致病因素作用下，TG從甲狀腺濾泡中溢入血液，成為異位抗原，刺激機體發(fā)生自身免

8、疫反應，產生TG-Ab，它是甲狀腺疾病中首先被發(fā)現(xiàn)的自身抗體，屬IgG。它可與TG形成免疫復合物，還可與巨噬細胞或K細胞結合，對甲狀腺濾泡細胞起破壞作用。TGAb陽性，明確指示病員的甲狀腺疾病有自身免疫反應的存在。臨床檢測發(fā)現(xiàn)：慢性淋巴細胞甲狀腺炎（hashimoto, 橋本）陽性率為80%；毒性彌漫性甲狀腺腫(Giaves病)陽性率為50%；原發(fā)甲低、粘液性水腫陽性率為50%；40歲以上婦女，陽性率可達10%，（可能是自身免疫性甲狀

9、腺病的早期反映）。,甲狀腺過氧化物酶抗體（TPOAb）,甲狀腺過氧化物酶（TPO）是甲狀腺激素合成（碘化、偶聯(lián)）的關鍵酶，是甲狀腺微粒體中的主要成分。 自身免疫性甲狀腺病（AITD）時可產生抗甲狀腺微粒體抗體（TMAb）其主要成分為TPOAb。TPOAb是IgG。 AITD時，TPO-Ab明顯升高，其中橋本氏甲狀腺炎可高達80-90%，毒性彌漫性甲狀腺腫（Graves,GD）為60%，而甲

10、狀腺結節(jié)，亞甲腫炎一般為陰性。,甲功指標的診斷有效性,1、甲亢 （1）診斷的有效性：TSH>FT3>FT4>TT3>TT4 （2） FT3↑（TT3↑）可由多種甲狀腺疾病引起，應注意鑒別2、甲減 診斷的有效性：TSH >FT4 >TT4 > FT3>TT3,3、甲亢治療 （1） 激素變化順序FT4（TT4 ）↘→FT3（TT3 ）↘ →TSH↗

11、（2）隨訪的有效性：FT4 >TSH > TT4 >FT3 > TT3 （3） TSH的改變滯后于FT4（特別病程長、藥控差者） （4）治療藥物過量： a. 臨床：低代謝癥候：畏寒、心緩、嗜睡、便干、 浮腫、甲狀腺腫大 b. FT4↓/TSH↑,甲功指標的診斷有效性,甲功檢測的干擾因素,新生兒：TSH↑（≤20mU/L） FT4 ↑;TT4 ↑避

12、孕藥： TT4 ↑肝炎： TT4 ↑肝硬化： TT4↓妊娠： TSH↓； TT4 ↑抗癲癇藥（卡馬西平，苯巴比妥，苯妥英）： TT4↓胺碘酮： TT4 ↑(嚴重者可致碘甲亢)重癥患者： TT3↓,化學發(fā)光的臨床應用,甲狀腺疾病生殖系統(tǒng)疾病代謝疾病腫瘤標志物貧血心臟疾病生長激素炎癥因子……,性激素檢測項目,雌二醇　總睪酮　孕酮　泌乳素　卵泡刺激素　黃體生成素,,性激素六項,人

13、絨毛膜促性腺激素HCG,性激素六項的生理變化,LHFSHPRLE2PROGT,,,垂體激素,甾體激素,垂體泌乳素（PRL）,PRL（Prolactin）是由垂體前葉PRL細胞合成和分泌的，除妊娠和哺乳外，人PRL含量極少。由下丘腦分泌的PRL釋放因子（PRF）、PRL釋放抑制激素（PIH）調節(jié)。 [生理效應] 1、促進乳腺生長、發(fā)育和分泌乳液。 2、高PRL血癥可引起性腺機能低下

14、（抑制垂體分泌 FSH、LH，抑制性腺分泌雌激素）， 女性出現(xiàn)黃體期期縮短，隨后出現(xiàn)不排卵，月經稀發(fā)和閉經，不育；男性會出現(xiàn)睪酮分泌減少及生精障礙，表現(xiàn)為性欲減退，陽痿及不育。,[臨床意義] 升高：1、下丘腦病變（顱咽管瘤、轉移性腫瘤）使PIH產生減少，PRL升高。2、垂體泌乳素瘤：90%PRL升高。3、原發(fā)性甲減：由于甲狀腺激素減少，反饋作用減弱，下丘腦促甲狀腺激素釋放激素（TRH）分增多，TRH興奮TSH和 PRL的分泌。,

15、4、胸壁病變：乳癌、乳頭刺激、胸壁創(chuàng)傷、帶狀皰疹等。5、肝、腎疾?。篜RL的代謝清除減少。6、糖尿?。嚎赡苁歉哐且种浦袠卸喟桶返尼尫牛餚RL增高。,減低：1、垂體前葉功能減退：席漢氏綜合癥等。2、藥物：如左旋多巴能抑制PRL的釋放?！铮篜RL 升高是月經紊亂、閉經、不孕不育最常見的原因之一。,[注意事項]1、PRL分泌呈脈沖式，有晝夜性變化，夜間高于白天。上午8~10時最低，為基礎分泌狀態(tài)。中午12點開始升高，下午4

16、、8點均為分泌高峰。另外，緊張、受刺激等因素也可使其分泌增加，因此，測定PRL最好在靜息狀態(tài)下，上午8~10點采血。2、嚴重溶血標本不能檢測，標本4℃不超過一周。,促性腺激素（GTH）,垂體分泌的促性腺激素（GTH）有黃體生成素（ Luteinizing hormone,LH）和卵泡刺激素（Follicle stimulating hormone,FSH），均為糖蛋白，含有α和β亞單位， 獨立的α和 β亞單位無生物學活性，兩者結合才

17、有促性腺激素作用。,[生理效應]1、女性：FSH主要生理功能是刺激卵泡的生長和卵巢顆粒細胞的增生，在卵泡期LH和FSH共同促進卵泡的成熟，刺激卵巢分泌雌激素和孕酮，在月經中期 LH急劇升高，排卵后持續(xù)的LH分泌刺激黃體生成孕酮。,2、男性：FSH刺激睪丸支持細胞的發(fā)育，促進生殖細胞的發(fā)育分化產生成熟的精子。LH的主要作用是促進睪丸間質細胞的增生，促進其合成分泌雄性激素—睪酮。,[臨床意義] LH、FSH檢測是鑒別卵巢

18、、垂體、下丘腦閉經的有效方法。 升高： 1、 FSH、LH均升高提示卵巢功能衰竭； 2、原發(fā)性性功能低下；LH、FSH顯著增高，男性伴睪酮（T）低下，女性雌二醇＜30 pg/ml ，伴月經稀發(fā)或閉經。 3、 GTH細胞瘤； FSH或LH瘤患者 LH、FSH 、T都增高。,4、真性性早熟； 青春期前兒童LH、FSH同時增高提示真性性早熟。5、更年期綜合癥； FSH 、LH水平均升高，F(xiàn)SH高于LH，絕經期后兩者均

19、明顯升高。6、多囊卵巢綜合癥；若LH/FSH＞2為其診斷參考。7、克氏綜合癥；,減低： （1） FSH、LH均為低值提示為垂體或下丘腦閉經。 （2）繼發(fā)性 性功能低下（低促性腺激素型性功能低下）,雌激素（Estrogen, E）,成熟卵巢合成分泌許多激素，包括雌激素（E）、孕酮（P）等。部分E可來源于睪丸、胎盤、腎上腺等。其17位上的氫被羥基置換則為雌二醇（E2）、加上16位上被取代則為雌三醇（E3）、

20、17位上的氫被酮基置換則為雌一醇。正常育齡婦女E2的活性最強，E2:E3:E1=100:30:20。絕經后E1/E2 值顯著增高，E1為絕經婦女體內主要的雌激素。E3為E1、E2的降解產物，活性最弱，但孕期是非孕期的幾百倍乃至上千倍。故孕晚期測定E3 對評價胎兒、胎盤功能具有重要價值。,1、雌二醇（E2）[生理效應] (1)促進女性有正常的成熟發(fā)育，刺激陰道、子宮、輸 卵管及第二性征的發(fā)育。刺激乳腺的發(fā)育。(2)促進

21、子宮平滑肌的生長及子宮內膜的發(fā)育，維持正常的月經周期。(3)在排卵調控中起核心作用。(4)對蛋白質、糖、脂肪、水、電解質代謝有一定的影響。,[臨床意義] E2增高 1、多胎妊娠：胎盤合成雌激素增多。 2、糖尿病孕婦：E2能刺激胰島素的分泌，使血漿胰島素水平增加。 3、肝硬化：滅活減少。 4、卵巢腫瘤 5、性早熟（真性）,E2減低1、妊高癥2、原發(fā)性卵巢疾?。盒韵俨话l(fā)育、Turner氏綜合癥、卵巢功能早衰

22、。3、垂體前葉疾病，如席漢氏綜合癥。4、葡萄胎5、繼發(fā)性性功能低下：下丘腦或垂體疾患使促性腺激素分泌不足，導致E2下降。,孕酮（ P）,孕酮是卵巢分泌的，妊娠期主要來源于胎盤。男性主要來自腎上腺。,[生理效應] 1、對子宮的作用：維持妊娠。 2、對乳腺的作用：使乳腺腺泡發(fā)育成熟。 3、對垂體、下丘腦促激素的分泌有反饋作用。 4、產熱作用：興奮下丘腦體溫調節(jié)中樞，基礎體溫可升高0.5~1.0℃，臨床上將這種基礎體溫的

23、變化作為判斷排卵期的一個標記。 5、使血管和消化道平滑肌松弛。,[臨床意義] 1、增高：葡萄胎、輕度妊高癥、多胎等。 2、減低：黃體功能不全，胎兒發(fā)育遲緩，死胎，嚴重的妊高癥。,★：主要是判斷是否有排卵，黃體功能是否健全，因此要求在月經前一周采血。,睪酮（T）,睪酮為循環(huán)中的主要雄激素。是睪丸間質細胞在LH的作用下，連續(xù)不斷的生成和分泌睪酮。在女性主要由腎上腺產生。,[生理效應] 1、刺激外生殖器生長與Wollfi

24、an 管的分化。 2、刺激第二性征的產生并維持它們的正常狀態(tài)。 3、促進蛋白質的合成并抑制其分解。 4、與FSH協(xié)同作用維持正常的生精作用。 5、對垂體LH分泌有反饋性抑制作用。,[臨床意義] 1、增高：（1）睪丸良性間質細胞瘤；（2）垂體功能亢進；（3）畸胎瘤；（4）女性多毛癥。（5）卵巢腫瘤、多囊卵巢綜合癥。（6）真性性早熟,2、減低：（1）性功能減退；（2）無睪癥；（3）垂體功能減退

25、；（4）男性更年期。（5）男性Turner綜合癥：為常染色體顯性遺傳性疾病。,,生殖激素測定中需注意的問題,1、年齡：患者的年齡是判斷性激素、促性腺激素是否正常的重要依據(jù)。青春期前性激素、促性腺激素均處于低水平，女性更年期后性激素明顯減低，而LH、FSH在50-65歲間持續(xù)高于40IU/L，而65歲以后隨著垂體的衰老，LH、FSH逐漸下降，到80歲只有幼兒的水平。,2、周期：月經周期是判斷女性性激素是否正常時需考慮的問題。如要考察是

26、否排卵，應在月經中期測定LH峰值。觀察黃體功能應在經前1周左右采血。女性生殖激素的申請單上必須注明末次月經時間，以便分析結果時參考。,3、綜合判斷結果：需幾個激素同時測定，聯(lián)合分析。如雌激素水平持續(xù)低于100pmol/L ，究竟是卵巢本身功能問題還是垂體或下丘腦問題，只有與LH、FSH同時測定才能判斷。如這時 LH、FSH持續(xù)高于100 IU/L，則表明卵巢本身出了問題，否則，是垂體以上部分功能問題，進一步診斷需作垂體興奮試驗。,4、結

27、果判斷時需考慮的其它因素：正在用激素藥物或進食含激素藥物將影響結果；高脂餐后采血，不僅激素在血清和脂質層中的分布不同，同時還干擾測定中的免疫反應，造成結果不可靠。,總的來說，性激素的分泌雖不似腎上腺皮質激素和生長激素的分泌那樣存在明顯的晝夜節(jié)律，但每日中仍有一定波動。通常清晨高于下午，青春期這種差異更大。為便于比較，一般均在晨8點取血。必須指出，上述時間取樣測定的結果，雖能代表取樣時的血清濃度，但是并不一定能真實地反映性腺的內分泌功能，

28、特別是女性，更存在著月經周期中不同期的每一天的差異，有時這種天間差異可相當巨大，如排卵日與前后日間。,小結,化學發(fā)光的臨床應用,甲狀腺疾病生殖系統(tǒng)疾病代謝疾病腫瘤標志物貧血心臟疾病生長激素炎癥因子……,代謝類激素檢測,胰島素Ｃ肽皮質醇促腎上腺皮質激素甲狀旁腺激素降鈣素,胰島素與Ｃ肽檢測,糖尿病患者胰島功能評估方法：0，30，60，120，180分鐘血糖、血胰島素、血C肽測定　胰

29、島素抵抗評估（多囊卵巢綜合征，單純性肥胖等）方法：0、120分鐘胰島素和C肽測定　低血糖原因待查方法：低血糖發(fā)作時，同時測定血糖和血胰島素,皮質醇,腎上腺皮質束狀帶和網狀帶細胞分泌　24小時晝夜節(jié)律，上午8時為峰濃度，午夜2時為谷濃度，通常取上午8時和下午16時為采血時間　參考值：上午8時：　　4.3~22.4 ug/dL　　　　　　下午16時： 3.09~16.66 ug/Dl 正常節(jié)律：上午:

30、下午　≈　2:1 24小時尿皮質醇：無晝夜節(jié)律影響，無血漿結合蛋白的影響　　　　參考值： 55.5~286 ug/24h,皮質醇檢測的臨床應用,庫欣貌患者（結合ATCH促腎上腺皮質激素）　肥胖患者（鑒別單純性肥胖和病理性肥胖）　多發(fā)痤瘡、多毛、男性化表現(xiàn)等,皮質醇測定,地塞米松抑制試驗,甲狀旁腺激素（PTH）,PTH是由甲狀旁腺主細胞分泌的肽類激素，體內可分解為N端，C端和一些小片斷，但只有完整的PTH才具有生物活性。

31、　PTH可通過促進骨吸收，活化VitD3，升高血Ca，降低血磷酸鹽?！⊥暾谞钆韵偌に兀╥PTH）參考值：1.48~7.63 pmol/L,iPTH結果判讀,化學發(fā)光的臨床應用,甲狀腺疾病生殖系統(tǒng)疾病代謝疾病腫瘤標志物貧血心臟疾病生長激素炎癥因子……,腫瘤——全球關注的焦點之一,,在中低收入國家，腫瘤的死亡率高達63％,,全球超過1千2百萬的新發(fā)患者,Source: http://www.cancer

32、.gov/ncicancerbulletin/100609/page4,預期到2030年，全球新發(fā)患者超過2千7百萬，每年死亡患者將超過1千7百萬,,,,,,,,遠處轉移情況,原發(fā)灶的位置,數(shù)量、大小,受累的淋巴結情況（數(shù)量、位置）,細胞類型，腫瘤等級,決定腫瘤分期的要素,Source: http://www.cancer.gov/cancertopics/factsheet/Detection/staging,5年生存率: 早期發(fā)現(xiàn)對

33、生存率的影響,,乳腺癌,前列腺癌,直腸結腸癌,卵巢癌,90%,92%,93%,65%,100%,73%,79%,40%,100%,56%,51%,20%,32%,8%,18%,100%,睪丸癌,95%,95%,70%,N/A,胰腺癌,40%,20%,8%,2%,Sources: http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/ency/article/000913.htm, http

34、://www.cancer.org/docroot/CRI/content/CRI_2_4_1X_What_are_the_key_statistics_for_prostate_cancer_36.asp http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs297/en/,腫瘤,I期,II期,III期,IV期,,,,免疫檢測,,生物物理學技術,,,,,,,,診斷價值,,

35、潛伏期（數(shù)月至數(shù)年）,,早期,發(fā)病期,晚期,,易于檢測、隨訪,由腫瘤細胞直接產生或由非腫瘤細胞經腫瘤細胞誘導而合成的物質,其濃度受腫瘤細胞的數(shù)量、性質、血供以及類型等多種因素的影響,可以對腫瘤的存在、發(fā)病過程和預后作出判斷,少數(shù)具有腫瘤特異性和/或器官特異性,腫瘤標志物,腫瘤標志物,,腫瘤細胞的代謝產物如：糖酵解產物，組織多肽抗原，核酸分解產物,分化紊亂的細胞基因產物如：甲胎蛋白，癌胚抗原，異位激素等,細胞壞死、崩解，釋放如血循環(huán)

36、物質如：甲狀腺球蛋白，CYFRA21-1,腫瘤宿主細胞的細胞反應性產物如：特異性的免疫球蛋白,來源,腫瘤標志物的來源,靈敏度 100%使 腫瘤能早期發(fā)現(xiàn)，早期診斷特異性 100% 即 腫瘤患者 為陽性，而非 惡性 腫瘤 患者為陰性，因此， 能對良、惡性腫瘤進行鑒別； 能 對腫瘤進行定位 ， 即 具有 器官特異性；與 病情嚴重程度、腫瘤大小或分期有關，即腫瘤越大或越晚期， 腫瘤標志物 濃度越高；監(jiān)測腫瘤治療效果， 即

37、腫瘤標志物 濃度增高或降低與治療效果密切相關 ；監(jiān)測腫瘤的復發(fā)， 即 腫瘤 治療后 腫瘤標志物 濃度降低，腫瘤復發(fā)時明顯升高；預測腫瘤的預后，即腫瘤標志物濃度越高，預后越差，反之亦然。但至今還沒有一種腫瘤標志物能完全滿足上述要求。,理想的腫瘤標志物,腫瘤標志物的應用價值,普查 定位分期療效檢測,1：普查：由于目前臨床常用的腫瘤標志物在診斷惡性腫瘤時靈敏度和特異性不夠高，故目前主要用于腫瘤的輔助診斷；不能作為腫瘤診斷

38、的主要依據(jù)；也不提倡對無癥狀人群進行普查，個別指標（如甲胎蛋白和前列腺特異性抗原）可用于高危人群篩,所以腫瘤標志物的篩查對高危人群有很大應用價值。,TM 應用于 高危人群篩查的原則   ⑴ 該腫瘤標志物對早期腫瘤的發(fā)現(xiàn)有較高的靈敏度    ⑵ 測定方法的靈敏度、特異性高和重復性好。    ⑶ 篩查費用經濟、合理。   ⑷ 篩查時腫瘤標志物異常升高，但無癥狀

39、和體征者，必須 復查和隨訪。,2：定位 由于絕大多數(shù)腫瘤標志物的器官特異性不強，因此腫瘤標志物陽性不能對腫瘤進行絕對定位。但少數(shù)腫瘤標志物，如前列腺特異性抗原（ PSA ）、甲胎蛋白（ AFP ）和甲狀腺球蛋白（ TG ）等對器官定位有一定價值。,3：確診 因目前TM無足夠的靈敏度，不能排除假陰性的結果，所以不能用于腫瘤的確診， 應用原則：篩查出來的高危人群應作近一步的確診檢測影像

40、學檢測 病理診斷等,4：TM 在判斷腫瘤的大小和臨床分期的價值 大多數(shù)情況下，腫瘤標志物濃度與腫瘤的大小和臨床分期之間存在著一定的關聯(lián)。但需注意各期腫瘤的腫瘤標志物濃度變化范圍較寬，會有互相重疊 , 因此 , 不能根據(jù)腫瘤標志物濃度高低來判斷腫瘤的大小和進行臨床分期。,5：TM最重要的臨床應用價值——療效檢測和預后判斷臨床可通過對腫瘤標志物治療前、后及隨訪中濃度變化的監(jiān)測，來了解腫瘤治療是否有效，

41、判斷其預后，為進一步治療提供參考依據(jù)。為確定何種腫瘤標志物適用于對該患者的監(jiān)測，在治療前應做相關腫瘤標志物檢測。目前尚無一種被普遍認可的用TM濃度來評價治療有效的標準，Beastall提出的方案是可行的無效：TM濃度與治療前相比下降50%有效：TM濃度與治療前相比下降>90%顯效：TM濃度下降到非惡性腫瘤參考范圍內,以CEA為例治療中或治療后TM濃度變化3種類型,A：提示腫瘤全部除去病情緩解,B：提示復發(fā)或轉移,

42、C：提示腫瘤殘留或腫瘤轉移,注：化療 放療 和手術后測定TM濃度可能有短暫的升高，由于腫瘤的壞死所致化療 放療 和手術后測定TM濃度重新恒定升高，表示治療無效,腫瘤標志物測定的影響因素,體內因素： 肝功能損傷 腎功能損傷 膽汁淤積 自身免疫性疾病 藥物 物理檢查 生理變化,體外因素： 樣本來源：血液？體液？ 樣本保存和處理 微生物感染,常見假陽性與假陰性原因,假陽性 良性疾病，如炎癥等 肝腎功能障

43、礙 生理性升高，如妊娠 強烈治療過程中，一過性升高,假陰性 細胞或細胞表面被封閉 體內形成自身抗體，與腫瘤抗原形成免疫復合物 腫瘤組織血循環(huán)差，腫瘤標志物無法釋放入外周血 標本采集、儲存不當,,AFP,AFP,甲胎蛋白是一種肝細胞和生殖細胞（非精原細胞）惡性腫瘤的標志物。 AFP在胚胎發(fā)育期由卵黃囊和肝臟大量合成，是胎兒循環(huán)中的主要蛋白之一。嬰兒出生后水平下降，至18月降至正常人水平。 生物半衰期：2－8天 正常成

44、人：血清500μg/L：多見于原發(fā)性肝癌，與腫瘤組織大小相關。,AFP與肝癌,AFP診斷肝細胞癌的標準： AFP>500ng/ml持續(xù)4周 AFP由低濃度逐漸升高，持續(xù)不降 AFP在200－500ng/ml持續(xù)8周 排除妊娠和生殖胚胎腫瘤,AFP的臨床應用,高?；颊吆Y查 判斷預后 調整治療,臨床應用,檢測對象,疑診肝細胞癌患者 疑診胚胎細胞腫瘤（睪丸、卵巢、外生殖器腫瘤）患者 肝細胞癌和胚胎細胞腫瘤患者治療中或治療

45、后的隨訪 肝硬化和乙肝患者向原發(fā)性肝細胞發(fā)展的監(jiān)測 胚胎細胞腫瘤高?；颊叩谋O(jiān)測，如胚胎細胞腫瘤患者的孿生兄弟和姐妹,,CEA,CEA,CEA于1965年被發(fā)現(xiàn)，用人直腸癌組織抽提物免疫動物所獲抗血清經正常人直腸組織抽提液吸收。此抗血清能與腫瘤組織反應而不與正常組織反應。由于這種抗原也能在胚胎組織中發(fā)現(xiàn)，故稱“癌胚抗原”。CEA在正常情況下由胎兒胃腸道上皮、胰和肝細胞合成，經胃腸道代謝。腫瘤狀態(tài)時CEA進入血和淋巴循環(huán)，使血清CEA

46、上升。正常群體CEA值：<5μg/L；吸煙者<10μg/L， 半衰期2－8天CEA在妊娠前6個月內含量升高，出生后血清中含量很低。在結腸癌、直腸癌、胃、肺癌等惡性腫瘤時，CEA常明顯升高超過正常值5－10倍。癌腫浸潤、轉移時CEA明顯升高，手術后6周CEA水平可恢復正常。持續(xù)升高：預后不良,CEA升高的常見原因,肝硬化－－45%肺氣腫－－30%直腸腺癌－－5%良性乳房疾患－－15%潰瘍性結腸炎－－15%,直腸

47、癌 －－70% 胰腺癌 －－55% 胃腸癌 －－50%肺癌－－ 45% 膀胱癌－－ 40%乳腺癌－－ 40%卵巢癌 －－25%,良性疾病中的陽性率,惡性疾病中的陽性率,CEA的臨床應用,臨床應用,不適于篩查 隨訪其變化可以幫助判斷預后，觀察療效 乳腺癌患者中明顯升高，提示肺、骨轉移可能 肺癌中CEA高，提示非小細胞肺癌可能大,檢測對象,結腸直腸癌患者治療前后的監(jiān)測 甲狀腺髓樣癌患者治療前后的監(jiān)測

48、CEA陽性的胃癌、胰腺癌、乳腺癌、肝癌和肺癌患者治療前后的監(jiān)測 結腸直腸癌危險患者篩查，如腸炎患者、家族性息肉腺瘤患者或有癌癥家族史的個體,,CA125,CA125,卵巢癌和子宮內膜癌的腫瘤標志物 正常人血清中CA125的臨界值為35U/ml 半衰期5天，在血中很快代謝，所測結果能反映腫瘤近期的變化狀態(tài)CA125在卵巢癌，尤其是上皮性卵巢癌、子宮內膜癌可出現(xiàn)升高，還可在肺癌、宮頸癌等腫瘤狀態(tài)時升高。CA125在子宮內膜異位癥、1

49、%的健康婦女、3%的患良性卵巢疾病婦女及其他非腫瘤患者也可見到升高。,CA125在各種疾病中的敏感度,良性疾病,惡性疾病,CA125的臨床應用,卵巢癌的輔助診斷 卵巢癌患者治療過程中的隨訪，療效評估 卵巢癌患者病程隨訪，跟蹤復發(fā) 胰腺癌患者中，CA199之后的次選指標,臨床應用,檢測對象,疑診卵巢癌患者 卵巢癌患者治療監(jiān)測 胰腺癌患者,,CA15-3,CA15-3,乳腺癌患者病程監(jiān)測的重要指標 ,但靈敏度有限，因此不適合做診斷

50、和篩查用。正常人群：< 35U/L半衰期：5－7天對于乳腺癌：歐洲腫瘤組織標志物（EGTM）建議同時使用CA15-3和CEA來提高臨床檢測的靈敏度。兩者聯(lián)合應用對腫瘤復發(fā)和轉移檢測的臨床敏感度可從30－50％提高到80％，臨床特異度可達87％。在卵巢癌中，也有30～71％的陽性率，治療過程中，監(jiān)測CA15-3可幫助判斷治療效果。,CA15-3的應用,乳腺癌患者的療效評估 乳腺癌患者病程監(jiān)測，跟蹤復發(fā) 卵巢癌患者的療效評

51、估,臨床應用及檢測對象,,CA19-9,CA19-9,CA19-9是廣譜腫瘤標志物，主要用于消化系統(tǒng)惡性腫瘤，包括胰腺癌、胃癌和腸癌等。對胰腺癌的作用尤為明顯，胰腺癌中靈敏度可達86％。其他如胃癌、結直腸癌中也有很高的陽性率，可達50－80％。正常人群：< 37U/L，半衰期4－8天。肝膽系統(tǒng)疾病及慢性胰腺炎時也可見CA19-9升高,CA19-9應用,主要用于胰腺癌、胃癌、結直腸癌、肝膽系統(tǒng)癌 輔助診斷療效評估病程監(jiān)測

52、跟蹤復發(fā)也可用于良惡性腹水的鑒別 腹水中臨界值為30U/ml，靈敏度 50％，特異度 100％,臨床應用及檢測對象,獨有的腫瘤標志物,,復合型前列腺特異性抗原cPSA,乳腺癌腫瘤標志物HER-2/neu,,,,,,,PSA具有高度組織特異性，但缺乏癌腫特異性,男性最常見的腫瘤，占所有腫瘤的15％,每年新發(fā)病例700,000例,早期診斷則5年生存率可達100％,PSA和cPSA是前列腺癌篩查、診斷、隨訪的重要指標,前列腺癌,,,

53、怎樣診斷前列腺癌,,,,,,PSA/cPSA標志物檢測直腸指檢組織活檢超聲檢測影像學檢查,,,,,,復合型前列腺特異性抗原 cPSA,前列腺癌是男性第二大惡性腫瘤，僅次于肺癌。 PSA是前列腺癌篩查、診斷、隨訪的重要指標。 PSA是主要有前列腺上皮細胞產生的一種蛋白酶，具有很高的組織特異性，但缺乏癌腫特異性。 無論是良惡性前列腺增生，均可檢出PSA的增高。 PSA在血液中有游離型fPSA和結合型cPSA兩種形式。,獨有的

54、腫瘤檢測項目：cPSA,cPSA主要是與α-抗糜蛋白酶（ACT）結合而成。結合發(fā)生在PSA進入血液循環(huán)之前。 ACT可在癌細胞中大量表達和分泌，因而導致cPSA 在前列腺癌中異常增高。而在前列腺良性增生中，由于ACT的合成較少，PSA多以游離形式釋放入血。 fPSA在血液中的穩(wěn)定性較差，而且受直腸指檢和前列腺穿刺等檢查的影響較大。,各種形式PSA的應用價值比較,Sn：敏感度 Sp：特異性 ＋PV：陽性預測值 ?PV：陰

55、性預測值 OA：總準確度,國外醫(yī)學：臨床生物化學與檢驗學分冊；2002；23（1）：36潘靜改善血清前列腺特異性抗原對前列腺癌診斷特異性的幾種方法,,,,,,,早期發(fā)現(xiàn)則5年生存率可達90％,女性最常見的腫瘤，占所有女性腫瘤的26％,每年新發(fā)病例100,000例,腫瘤的性質將影響治療方案的選擇，進而影響預后,乳腺癌,,HER-2/neu是判斷腫瘤侵襲力及預后的重要指標,HER-2/neu與乳腺癌,乳腺癌是女性腫瘤中發(fā)病率最高的腫

56、瘤。據(jù)美國2006年數(shù)據(jù)，約占所有腫瘤的31％。 腫瘤的性質、侵襲力、治療方案的選擇等都影響患者的預后。 HER-2/neu是判斷腫瘤侵襲力及預后的重要指標，也是選擇化療方案的重要依據(jù)。,HER-2/neu原癌基因,Human Epidermal growth factor Receptor 2（人類表皮生長因子受體－2)的縮寫 最初在腦腫瘤細胞中發(fā)現(xiàn)，也稱為neu，并且由于與病毒癌基因（V-erbB）的同源性很高，故也稱為er

57、bB-2 HER-2/neu在正常人體腔上皮、腺上皮和胚胎中均有表達，但無基因擴增 其產物p185是某種未知生長因子的受體，對細胞生長及分化具有重要作用,HER-2/neu檢測的臨床意義,判斷腫瘤性質，評估預后，監(jiān)測治療狀況 HER-2/neu過表達提示預后差，腫瘤易于轉移。 HER-2/neu上升超過15％，提示腫瘤進展。指導選擇合適的治療方案 HER-2/neu過表達提示對某些常規(guī)化療方案耐藥。 可選擇針對性的靶

58、向治療。,血清 HER-2/neu 臨床應用,,,,基礎水平HER-2檢測結合組織活檢,新輔助治療中檢測血清HER-2/neu水平,結合血清HER-2/neu 檢測,影像學檢查和靶向治療,輔助治療中血清HER-2 水平檢測,腫瘤標志物的合理應用,每一個單獨的腫瘤標志物的敏感性和特異性都有一定的限度，而選擇相關的腫瘤標志物進行聯(lián)合檢測，則可以大幅提高腫瘤的早期檢出率和特異度,（一）聯(lián)合應用,,單一指標的判定對卵巢惡性腫瘤的診斷價值,腫

59、瘤標志物的聯(lián)合應用,,聯(lián)合檢測對卵巢惡性腫瘤的診斷價值(%),腫瘤標志物的聯(lián)合應用,腫瘤標志物的合理應用,腫瘤標志物的結果判讀必須結合患者的臨床信息如病史、體格檢查結果、影像學檢查結果等多種診斷手段進行綜合分析、判斷。單一的腫瘤標志物檢測不可作為腫瘤疾病的診斷依據(jù)。,（二）綜合分析,腫瘤標志物的合理應用,雖然每個腫瘤標志物都給出了一個相對確定的臨床決定值，但對于每個患者而言，其自身的基線值會更具判斷意義。尤其在病程分析、療效判斷等應用

60、中更需要動態(tài)觀察腫瘤標志物的水平變化以幫助臨床作出正確的選擇。檢測頻率：術前和化療前應做第一次檢測第6周做第一次復查每三個月檢查一次第3－5年，每半年一次第5－7年，每年一次7年后可停止復查期間若有一次升高，需在一月內復查一次，兩次均升高需考慮復發(fā)。,（三）動態(tài)觀察,化學發(fā)光的臨床應用,甲狀腺疾病生殖系統(tǒng)疾病代謝疾病腫瘤標志物貧血心臟疾病生長激素炎癥因子……,貧血,維生素B12鐵蛋白

61、葉酸,貧血,紅細胞通過血紅蛋白在血液中運送氧氣。當沒有足夠的血紅蛋白或者紅細胞數(shù)量過少時，引起貧血對于有效的紅細胞和血紅蛋白的產生來說，維生素B12和葉酸是必要的營養(yǎng)物質。低水平的維生素B12和葉酸是引起貧血的原因。,貧血,鐵蛋白是一種大分子的儲鐵蛋白多數(shù)存在于肝、脾和骨髓以及血漿中鐵蛋白的水平，通常能夠反應體內大部分鐵的水平紅細胞和血紅蛋白的產生都需要鐵鐵蛋白通常協(xié)助診斷鐵缺乏性貧血,促紅細胞生成素（EPO）檢測,適應癥：

62、 原因不明的正細胞性貧血 疑為腎性貧血 EPO治療前的基準值EPO降低： 慢性腎衰，真性紅細胞增多癥EPO增高： 組織缺氧；非腎性貧血；繼發(fā)性紅細胞增多癥； 部分惡性腫瘤；妊娠；急性出血,化學發(fā)光的臨床應用,甲狀腺疾病生殖系統(tǒng)疾病代謝疾病腫瘤標志物貧血心臟疾病生長激素炎癥因子……,內容,心臟標志物組合Ul

63、tra-Troponin I 超敏肌鈣蛋白ICK-MB 肌酸激酶同工酶 Myoglobin 肌紅蛋白 BNP B型利鈉肽 Homocysteine 同型半胱氨酸,心臟標志物,肌鈣蛋白I,肌紅蛋白,肌酸激酶質量,B型利鈉肽,同型半胱氨酸,心肌缺血損傷標志物 特異性靈敏性最好,心肌缺血損傷標志物 特異性不佳，但靈敏性最好,心肌缺血損傷標志物 特異性、靈敏性較好,心臟功能，心室負荷的標志物,動脈粥樣硬化、冠心病的標志物,

64、心肌損傷標志物,Marker Kinetics,Initial rise Peak Renormalize,CK-MBmass 3- 8 h 12- 24 h 48-72 h肌酸激酶MB同工酶質量Myoglobin 1- 4 h 6-9

65、h 6-24 h肌紅蛋白Troponin I 3 - 8 h 12-24 h 4 - 7 days肌鈣蛋白 T 3 - 8 h 12-96h 10 - 14 days,,,暫時性腦缺血 (TIA) 缺血性中

66、風嚴重腿部缺血,不穩(wěn)定心絞痛 (UA),急性心肌梗死 (AMI),斑塊形成穩(wěn)定性心絞痛間歇性跛行,Adapted from: Stary H.C. Circulation. 1995;92:1355-1374 Fuster V. Vasc Med. 1998;3:231-239 Ross R. NEJM. 1999;340:1

67、15-126,心力衰竭,,心肌損傷,,斑塊,心血管疾病 : 一個連續(xù)漸進的過程,Time to Thrombolytic Agent(h),Benefit (%),Tiefenbrunn and Sobel. 1992,GISSI-3 Study on Population（1993） n = 74 365 patients mean = 5.43 h median = 2.27 h(從病人癥狀發(fā)作到送到醫(yī)院的時間),最大療效,

68、確定的療效,無明顯療效,治療AMI時間的重要性,最特異的心血管標志物－－肌鈣蛋白,Troponin I 在心肌外不存在? 100%器官特異性,Troponins是直接與肌纖維收縮相關的蛋白.,建議的草案,ESC/ACC 推薦最新的心肌損傷的首選標志物是肌鈣蛋白 (I 或 T), 它對心肌組織幾乎有絕對的特異性, 同時具有很高的靈敏度, 可以反映顯微級的壞死。cTn 升高應被定義為超過參照控制組測定值的單側第 99百分位值可接受