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文檔簡介
1、目的:探究小檗堿是否對(duì)大鼠自體原位肝臟移植引起的腸道損傷具有保護(hù)作用以及可能的機(jī)制。
方法:SD雄性大鼠24只,健康狀態(tài)良好,采用隨機(jī)數(shù)字表法,將其隨機(jī)分為3組:假手術(shù)組(S組)、自體原位肝臟移植模型組(AT組)、自體原位肝臟移植模型組+小檗堿組(BBR組)。S組大鼠僅接受麻醉后開腹,游離肝臟周圍的血管及韌帶后關(guān)腹;AT組大鼠采用自體原位肝臟移植模型,使用4℃乳酸林格氏液持續(xù)灌注,30 min后隨即恢復(fù)肝臟血液灌注,沖洗腹腔后
2、關(guān)腹;小檗堿組(BBR組)大鼠術(shù)前7 d連續(xù)給予200 mg·kg-1·d-1小檗堿灌胃,手術(shù)操作同AT組。于再灌注8 h時(shí),抽取下腔靜脈血,檢測D-乳酸和內(nèi)毒素的濃度。距回盲部2 cm處切取5 cm回腸組織,稱量回腸的濕重,隨后將其放至80℃烤箱中,24小時(shí)后再次稱量其重量,獲取組織的干重。取部分腸組織制成腸組織勻漿,測定腸組織MDA及SOD活性。采用免疫組織化學(xué)方法和Western blot技術(shù)分別檢測細(xì)胞色素C及Bax、Bcl-2
3、、AMPK蛋白的表達(dá)水平。腸組織標(biāo)本被甲醛溶液固定,于光學(xué)顯微鏡下觀察腸組織的病理學(xué)結(jié)果。腸上皮細(xì)胞的凋亡采用TUNEL法檢測。應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析,P<0.05代表統(tǒng)計(jì)學(xué)差異具有意義。
結(jié)果:S組腸組織形態(tài)結(jié)構(gòu)未見明顯異常,AT組和BBR組損傷明顯,BBR組損傷較AT組減輕。AT和BBR組腸組織的D-乳酸,內(nèi)毒素,濕/干重比率,MDA水平,Bax、AMPK蛋白表達(dá)水平,Cytochrome C表達(dá)水平和
4、凋亡細(xì)胞計(jì)數(shù)均高于S組,但AT組腸組織的D-乳酸,內(nèi)毒素,濕/干重比率,MDA水平,Bax蛋白表達(dá)水平,Cytochrome C表達(dá)水平和凋亡細(xì)胞計(jì)數(shù)較BBR組增高更明顯(P<0.05),AT組的AMPK蛋白表達(dá)水平低于BBR組(P<0.05)。AT組和BBR組腸組織SOD水平和Bcl-2蛋白表達(dá)水平低于S組,AT組較BBR組降低更明顯(P<0.05)。
結(jié)論:1.大鼠自體原位肝臟移植過程可以引起腸道的損傷,腸道粘膜水腫,濕/
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