小檗堿對大鼠肝臟冷缺血再灌注損傷的保護作用.pdf

1、目的:肝臟缺血再灌注損傷的發(fā)生是一個復雜、多因素的過程，其中包含炎癥反應、氧化應激以及細胞凋亡等會對肝臟細胞造成極大損害的過程。小檗堿是一種臨床常用的抗炎癥反應的藥物，近年來研究表明小檗堿還具有抗氧化應激和抑制細胞凋亡的作用。本實驗旨在研究小檗堿對大鼠肝臟缺血再灌注損傷的保護作用及其相關機制。
　　方法:健康雄性SD大鼠24只，周齡8～10周，體重200～250 g，采用隨機數字表法分成3組:假手術組（A組），對照組（B組）和小檗

2、堿組（C組），每組8只。A組僅進行開關腹操作。B、C組采用改良的胡建平等方法行在體原位冷缺血再灌注。本實驗模型中將胡建平等方法中原有的流入道脾靜脈改為門靜脈，將原有的流出道右腎上腺靜脈改為肝下下腔靜脈。增大了流出道口徑，避免肝臟灌注時水腫的發(fā)生。C組于手術前14 d給予小檗堿灌胃。B組于術前14 d給予等量生理鹽水灌胃。于術后6h取大鼠血液標本測定大鼠血清ALT和AST濃度，應用雙抗體夾心酶聯免疫(ELISA)法測IL-1β，IL-6評

3、估肝臟炎癥反應情況;取肝組織，觀察肝臟組織形態(tài)學變化;ELISA法測定組織MDA和SOD含量，評價肝臟組織氧化應激損傷情況;檢測肝臟組織caspase-3的活性;TUNEL法檢測細胞凋亡的情況。數據應用SPSS17.0進行統(tǒng)計分析處理，計量資料以均數±標準差((x)±s)表示。組間比較采用單因素方差分析，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。
　　結果:A組大鼠血清ALT、AST、IL-1β、IL-6和MDA含量均比B、C組低(P＜0

4、.01)，A組肝臟組織SOD含量高于B、C兩組(P＜0.01)。C組與B組相比大鼠血清ALT、AST、IL-1β和IL-6濃度含量均降低(P＜0.05)。與B組相比較，C組肝組織MDA含量降低（P＜0.05）而肝組織SOD含量升高（P＜0.05）。C組凋亡水平及capase-3的表達均低于B組(P＜0.05)。組織病理中A組為正常肝臟組織結構，B、C組肝臟組織出現程度不同的損傷。B組肝組織損傷明顯，C組肝組織損傷較B組輕。
　　結

5、論:1、本研究采用的大鼠肝臟冷缺血再灌注模型包含冷灌注、再復流過程，能模擬肝移植供肝灌注、再植過程。術后6h，轉氨酶升高，肝臟存在組織病理學損傷，提示建模成功;2、小檗堿對大鼠肝臟冷缺血再灌注損傷具有保護作用，表現為轉氨酶ALT、AST水平降低;細胞因子IL-1β和IL-6水平降低;MDA水平降低，SOD水平升高;凋亡細胞數減少;caspase-3的活性降低。其機制可能與小檗堿抑制冷保存肝臟炎癥反應的發(fā)生和氧化應激反應，減輕冷保存肝臟細