阿米洛利結合蛋白1在小鼠早期妊娠子宮中的表達與調節(jié).pdf

1、 II2.4.2 原位雜交實驗.................................................................................................................23 2.5 實時定量 PCR.............................................................................

2、..........................................25 2.5.1 RNA 提取........................................................................................................................25 2.5.2 反轉錄 ..............................

3、..............................................................................................26 2.5.3 引物序列 ................................................................................................................

4、........26 2.5.4 實時定量 PCR 反應.......................................................................................................26 2.5.5 融解曲線分析..........................................................................

5、.......................................27 2.6 WESTERN BLOT.......................................................................................................................27 2.6.1 試劑及溶液 ............................

6、........................................................................................27 2.6.2 樣品提取及蛋白濃度測定.............................................................................................28 2.6.3 SDS 聚丙烯酰胺凝

7、膠電泳 .............................................................................................28 2.6.4 Immunoblot 及 ECL 顯影 ..............................................................................................

8、.30 2.7 CEBPB 過表達.........................................................................................................................30 2.8 載體構建與熒光素酶活性分析..............................................................

9、..............................31 2.8.1 重組質粒 Abp1-pGL3 的構建.......................................................................................31 2.8.2 Abp1 啟動子序列定點突變.....................................................

10、.......................................32 2.8.3 熒光素酶活性分析.........................................................................................................33 2.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計 ...............................................

11、................................................................................33 3 結果 ....................................................................................................................................

12、..........34 3.1 ABP1 探針制備.......................................................................................................................34 3.2 ABP1 在早期妊娠圍著床期小鼠子宮中的表達 .............................................

13、......................34 3.2.1 原位雜交檢測 Abp1 在早期妊娠圍著床期小鼠子宮中的表達 ..................................34 3.2.2 圍著床期 Abp1 表達的定量分析..................................................................................34 3.3 活性胚泡對 ABP1

14、 表達的影響..............................................................................................35 3.3.1 原位雜交檢測 Abp1 mRNA 在假孕子宮中的表達 .....................................................35 3.3.2 原位雜交檢測 Abp1 mRNA 在延遲著床

15、和激活子宮中的表達..................................35 3.4 蛻膜化過程中 ABP1 的表達..................................................................................................35 3.4.1 原位雜交檢測 Abp1 mRNA 在體內蛻膜化中的表達.....................

16、.............................35 3.4.2 實時定量 PCR 檢測誘導蛻膜化中 Abp1 的表達 ........................................................35 3.4.3 cAMP 對 Abp1 表達的調節(jié) ........................................................................

17、...................36 3.4.4 阿米洛利（amiloride）對蛻膜化過程的調節(jié)..............................................................38 3.5 類固醇激素對 ABP1 作用.....................................................................................

18、.................38 3.5.1 實時定量 PCR 檢測激素對 Abp1 mRNA 的調節(jié)........................................................39 3.5.2 Western Blot 檢測孕酮對 Abp1 蛋白的調節(jié).................................................................39 3.6

19、組胺和腐胺對子宮基質細胞中 ABP1 表達的影響..............................................................40 3.6.1 組胺和腐胺對細胞中 Abp1 mRNA 表達水平的調節(jié)..................................................40 3.6.2 組胺對細胞中 Abp1 蛋白表達的調節(jié)....................