乙肝相關(guān)性慢加急性肝衰竭血清代謝組學(xué)分析及其動(dòng)態(tài)變化的研究.pdf

1、研究目的：
　　通過對(duì)乙肝相關(guān)性慢加急性肝衰竭血清代謝輪廓進(jìn)行橫斷面及動(dòng)態(tài)變化的研究，尋找有助于該疾病早期診斷、病情監(jiān)測(cè)及預(yù)后判斷的潛在生物標(biāo)志物，揭示乙肝相關(guān)性慢加急性肝衰竭發(fā)生發(fā)展過程中的物質(zhì)變化規(guī)律，為探索乙肝相關(guān)性慢加急性肝衰竭的發(fā)病機(jī)制奠定基礎(chǔ)。同時(shí)近期越來(lái)越多的證據(jù)表明，自分泌運(yùn)動(dòng)因子-溶血磷脂酸軸（ATX-LPA）在肝臟疾病中發(fā)揮重要的生物學(xué)功能。而ATX-LPA生物軸在乙肝相關(guān)性慢加急性肝衰竭中的生物學(xué)功能尚未見報(bào)

2、道，本研究旨在檢測(cè)乙肝相關(guān)性慢加急性肝衰竭患者血清自分泌運(yùn)動(dòng)因子（autotaxin，ATX）水平的變化，探討血清ATX作為乙肝相關(guān)性慢加急性肝衰竭患者生物學(xué)標(biāo)志物的臨床應(yīng)用價(jià)值。
　　研究方法：
　　采用UPLC-LTQ Orbitrap XL超高效液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng)對(duì)28例乙肝相關(guān)性慢加急性肝衰竭患者血清樣本進(jìn)行動(dòng)態(tài)追蹤檢測(cè)，并對(duì)照35例乙肝肝硬化Child pugh A級(jí)患者、30例慢性乙型肝炎患者以及35例健康志

3、愿者的血清標(biāo)本的代謝輪廓，建立疾病區(qū)分模型及病程追蹤模型，篩選出慢加急性肝衰竭患者組血清代謝譜變化的特征離子，同時(shí)對(duì)篩選出的特征離子進(jìn)行物質(zhì)鑒定，進(jìn)而根據(jù)病程進(jìn)展的不同趨勢(shì)分析這些代謝物質(zhì)所具有的預(yù)后判斷及病程監(jiān)測(cè)的潛在臨床應(yīng)用價(jià)值。另選擇50例乙肝相關(guān)性慢加急性肝衰竭患者、11例乙肝相關(guān)性慢加急性肝衰竭前期患者、39例乙肝肝硬化Child pugh A級(jí)患者、26例慢乙肝患者以及38例健康者，采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法（ELISA）對(duì)血清

4、ATX水平進(jìn)行檢測(cè)。
　　研究結(jié)果：
　　乙肝相關(guān)性慢加急性肝衰竭和乙肝肝硬化Child pugh A級(jí)患者、慢性乙型肝炎患者及健康志愿者血清代謝物譜明顯不同，建立了正交偏最小二乘（OPLS-DA）模型，共篩選出99個(gè)特征代謝離子，并鑒定出其中38種物質(zhì)，其在乙肝相關(guān)性慢加急性肝衰竭組血清中相對(duì)含量相比乙肝肝硬化Child pugh A級(jí)組均存在顯著差異。對(duì)乙肝相關(guān)性慢加急性肝衰竭血清代謝輪廓?jiǎng)討B(tài)追蹤研究發(fā)現(xiàn)，上述99種物質(zhì)

5、中，17種物質(zhì)（LysoPC(18:0)，L-蘇氨酸，DHAP(18:0),LysoPC(17:0)，m/z=210.05,乙酰乙酸，PA(20:4(5Z,8Z,11Z,14Z)e/2:0，LysoPC(15:0)，LysoPC(16:0)，m/z=258.818，LysoPC(14:0)，Phenylalanyl Phenylalanine，m/z=475.172,葡糖醛酸膽紅素，m/z=797.3，m/z=599.29及m/z=77

6、5.318）與乙肝相關(guān)性慢加急性肝衰竭患者預(yù)后相關(guān)，其在乙肝相關(guān)性慢加急性肝衰竭好轉(zhuǎn)組和死亡組間存在顯著差異；11種物質(zhì)（LysoPC(14:0)，Phenylalanyl Phenylalanine，m/z=775.318,m/z=475.172,葡糖醛酸膽紅素，m/z=797.3，m/z=599.29，LysoPC(22:5)，m/z=759.286，m/z=515.313和m/z=809.287）具有病情監(jiān)測(cè)價(jià)值，其在乙肝相關(guān)性慢

7、加急性肝衰竭好轉(zhuǎn)組中隨病情好轉(zhuǎn)呈現(xiàn)顯著變化趨勢(shì)。同時(shí)在乙肝相關(guān)性慢加急性肝衰竭患者及乙肝相關(guān)性慢加急性肝衰竭前期患者血清中ATX水平顯著高于乙肝肝硬化Child pugh A級(jí)患者、慢性乙型肝炎患者及健康志愿者，但乙肝相關(guān)性慢加急性肝衰竭前期患者血清中ATX水平低于乙肝相關(guān)性慢加急性肝衰竭患者，進(jìn)展至肝衰竭的肝衰竭前期患者血清ATX顯著高于沒有進(jìn)展至肝衰竭的患者。伴有自發(fā)性細(xì)菌性腹膜炎和/或肺炎的男性乙肝相關(guān)性慢加急性肝衰竭患者血清AT

8、X顯著高于不伴感染的乙肝相關(guān)性慢加急性肝衰竭患者。血清ATX水平與ALB,ALT AST，ALP，TBIL，TBA，INR及MELD評(píng)分等肝功能指標(biāo)具有顯著的相關(guān)性。
　　研究結(jié)論：
　　通過對(duì)乙肝相關(guān)性慢加急性肝衰竭的血清代謝物譜分析，代謝組學(xué)為疾病的診斷提供了新的方法，同時(shí)對(duì)乙肝相關(guān)性慢加急性肝衰竭血清代謝輪廓的動(dòng)態(tài)追蹤研究，鑒定了具有預(yù)后判斷及病情監(jiān)測(cè)價(jià)值的標(biāo)志物，部分揭示了乙肝相關(guān)性慢加急性肝衰竭的發(fā)病機(jī)制。在乙肝相