HBV相關(guān)急性-慢加急性肝衰竭患者外周血單核細(xì)胞功能抑制與疾病預(yù)后相關(guān)性的研究.pdf

1、第一部分 HBV 相關(guān)急性/慢加急性肝衰竭患者外周血中促炎/抑炎性細(xì)胞因子水平的研究
　　 目的：檢測HBV 急性肝衰竭患者（Acute Liver failure，ALF），HBV慢加急性肝衰竭患者（Acute on Chronic Liver failure，ACLF），急性乙型病毒性肝炎患者（Acute Hepatitis B，AHB）和慢性乙型病毒性肝炎患者（Chronic Hepatitis B，CHB）血漿中促炎/抑

2、炎性細(xì)胞因子含量，闡明HBV 相關(guān)ALF/ACLF 患者體內(nèi)免疫抑制狀態(tài)。
　　 方法：收集9 例HBV 相關(guān)ALF 患者和35 例HBV 相關(guān)ACLF 患者入院后首次留取的外周血標(biāo)本和臨床資料，17 例AHB患者和26 例CHB患者作為對照組。以APACHEIII 評分作為反映疾病嚴(yán)重程度的量化指標(biāo)。檢測患者血漿中細(xì)胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-10、IL-6和TGF-β的濃度。
　　 結(jié)果：

3、與AHB 組和CHB 組相比，HBV 相關(guān)ALF/ACLF 患者外周血中抑炎性細(xì)胞因子IL-10 明顯升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（U 值分別為31 和97，P 值分別為0.0108 和<0.0001），但抑炎性細(xì)胞因子TGF-β的濃度在ALF 組/ACLF 組與AHB 組/CHB 組之間的差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（U 值分別為36.5 和157.5，P 值分別為0.5097 和0.0676）；ALF /ACLF組患者外周血中具有促炎/抑炎雙向調(diào)

4、節(jié)作用的細(xì)胞因子IL-6 含量亦明顯升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（U 值分別為14 和87.5，P 值分別為0.0008和0.0001）；其他細(xì)胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-2 和IL-4 低于CBA 試劑盒檢測范圍下限。
　　 結(jié)論：HBV 急性/慢加急性肝衰竭患者血漿中促炎/抑炎性細(xì)胞因子的含量失衡，當(dāng)PTA< 22％時(shí)，HBV 相關(guān)ACLF 患者外周血中抑炎性細(xì)胞因子IL-10 水平顯著升高，患者體內(nèi)處于代償性抗炎性反應(yīng)

5、綜合癥（CARS），即存在免疫抑制狀態(tài)。
　　 第二部分 HBV 相關(guān)急性/慢加急性肝衰竭患者外周血單核細(xì)胞功能的變化
　　 目的：檢測免疫抑制狀態(tài)下HBV 急性/慢加急性肝衰竭患者外周血中單核細(xì)胞的分化能力、抗原遞呈功能和體外單核細(xì)胞的TNF-α分泌能力。
　　 方法：收集9 例HBV 相關(guān)ALF 患者和35 例HBV 相關(guān)ACLF 患者入院首次留取的外周血標(biāo)本，17 例AHB 患者、26 例CHB 患者和35

6、例健康志愿者（HD）作為對照組。以APACHEIII 評分作為反映疾病嚴(yán)重程度的量化指標(biāo)。檢測ALF 組、ACLF 組和對照組外周血中單核細(xì)胞的數(shù)量，單核細(xì)胞膜表面HLA-DR 的平均熒光強(qiáng)度以及LPS 在體外刺激單核細(xì)胞后TNF-α分泌量。
　　 結(jié)果：HBV 相關(guān)ALF/ACLF 患者的單核細(xì)胞膜表面HLA-DR 平均熒光強(qiáng)度較肝炎對照組均顯著下降，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（U 值分別為47.5 和248，P 值分別為0.0065

7、 和0.0046）；HBV 相關(guān)ALF/ACLF 患者的單核細(xì)胞在體外的TNF-α分泌量較肝炎對照組顯著降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（U=115.5，P<0.0001）。此外，體內(nèi)的單核細(xì)胞分化能力阻抑導(dǎo)致HBV 相關(guān)ALF/ACLF 患者外周血中CD14lowCD16+單核細(xì)胞（non-classcial monocyte，Mo3）的數(shù)量較肝炎對照組均明顯降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（K-W=41.6，P<0.0001）。
　　 結(jié)論

8、： HBV 急性/慢加急性肝衰竭患者外周血單核細(xì)胞的分化能力、抗原遞呈功能和體外TNF-α分泌能力等受到抑制，單核細(xì)胞功能失活化，進(jìn)一步加重免疫系統(tǒng)功能抑制。
　　 第三部分單核細(xì)胞體外分化能力與HBV相關(guān)急性/慢加急性肝衰竭患者預(yù)后的關(guān)系
　　 目的：在體內(nèi)，CD14hiCD16-單核細(xì)胞（Classical monocyte，Mo1）
　　 能分化成CD14hiCD16+單核細(xì)胞（Intermediate m

9、onocyte，Mo2）和CD14lowCD16+單核細(xì)胞（Non-classcial monocyte，Mo3）。動態(tài)實(shí)驗(yàn)顯示單核細(xì)胞分化能力恢復(fù)與否能反映病情進(jìn)展及臨床預(yù)后，因此，建立檢測單核細(xì)胞分化能力的體外實(shí)驗(yàn)體系，及早判斷HBV 相關(guān)ALF/ACLF 患者的臨床轉(zhuǎn)歸。
　　 方法：收集5 例HBV 相關(guān)ALF 患者和28 例HBV 相關(guān)ACLF 患者入院后首次留取外周血樣本，5 例AHB 患者、2 例CHB 患者和31

10、例HD 作為對照組。檢測在37°C、5％CO2 孵箱孵育后24 小時(shí)和36 小時(shí)后外周血中單核細(xì)胞Mo1 和Mo2 的數(shù)量。
　　 結(jié)果：選擇體外孵育36 小時(shí)后外周血單核細(xì)胞Mo1/Mo2 比值等于1 作為預(yù)測HBV 相關(guān)ALF/ACLF 患者預(yù)后的參照值，其預(yù)測HBV 相關(guān)ALF/ACLF 患者的預(yù)后不良的ROC 曲線下面積（AUROC）是0.746，敏感性是69.2％，特異性是80％。
　　 結(jié)論：單核細(xì)胞體外分化