硒對(duì)雞肝臟Se1W mRNA表達(dá)調(diào)控及缺硒誘導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡的研究.pdf

1、硒是人和動(dòng)物必需微量元素,在維持包括人在內(nèi)的很多物種的正常生理功能中起著重要作用,與一些疾病的發(fā)生如克山病、肝壞死及牲畜的白肌病密切相關(guān),在禽類的生長(zhǎng)發(fā)育、繁殖、免疫功能及抵抗疾病等方面發(fā)揮著重要生物學(xué)功能。肝臟是重要的硒積累和硒中毒的攻擊器官,缺硒可以引起肝臟細(xì)胞凋亡、變性、壞死,同時(shí)過量的硒可以引起硒中毒。動(dòng)物體內(nèi)硒存在的主要形式是硒蛋白。硒主要通過硒蛋白發(fā)揮其生物學(xué)作用。研究發(fā)現(xiàn),硒的攝入量與一些硒蛋白的變化相關(guān),硒在一定程度調(diào)控

2、硒蛋白的表達(dá)。硒蛋白W是動(dòng)物體內(nèi)硒蛋白家族的重要成員之一,目前關(guān)于硒蛋白W的研究主要集中在哺乳動(dòng)物,在禽類肝臟組織內(nèi)的表達(dá)與調(diào)控研究還未報(bào)道,低硒誘導(dǎo)雞肝臟細(xì)胞凋亡的機(jī)制也研究較少。
　　 本試驗(yàn)以雞胚、雛雞和育成公雞為實(shí)驗(yàn)對(duì)象。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處理如下,①零日齡雞胚分成3組,其中Se-Ⅰ組、Se-Ⅱ注射Na2SeO3使蛋清硒含量終濃度分別為0.08μg/ml、0.10μg/ml,并于12d、15d、18d、21d剖雞胚取肝組織;②一日

3、齡雛雞隨即的分為3組,L組、M組和H組分別飼喂飼喂硒量為0.033mg/kg、0.15mg/kg和1.5mg/kg的日糧,于15d、25d、35d、45d及55d剖殺采肝組織;③一日齡公雞隨即分為5組,Control組飼喂基礎(chǔ)日糧,Se-Ⅰ、Se-Ⅱ、Se-Ⅲ、Se-Ⅳ組分別添加Na2SeO3使硒含量分別為0.6mg/kg、1.1mg/kg、1.5mg/kg、2.0mg/kg飼喂90d剖殺取肝組織。通過檢測(cè)肝組織SelW、SecS、SP

4、S.1mRNA表達(dá),及L組和M組肝組織顯微結(jié)構(gòu)的觀察及細(xì)胞凋亡和凋亡相關(guān)基因(Caspase-3、Caspase-8、Fas)的檢測(cè),探討硒缺乏致雞肝臟細(xì)胞凋亡的機(jī)制及日糧中不同硒水平對(duì)雞肝臟組織中SelW及其合成代謝相關(guān)酶表達(dá)的影響,結(jié)果如下。
　　 1.通過對(duì)雞肝臟病理結(jié)構(gòu)觀察說明飼喂正常和富硒飼料雞肝臟形態(tài)完整,肝索排列整齊規(guī)則,組織無明顯變化。缺硒可導(dǎo)致肝臟組織結(jié)構(gòu)異常,肝索排列不整齊,炎性細(xì)胞浸潤(rùn),肝細(xì)胞變性、壞死和凋

5、亡。
　　 2.通過對(duì)雞胚、雛雞及育成公雞肝臟組織中硒含量與SelW、SecS、SPS.1mRNA水平的檢測(cè),表明日糧硒含量在0.033mg/kg-2.0mg/kg范圍內(nèi)可以調(diào)控肝臟中SelW、SecS、SPS-1mRNA表達(dá)水平,呈劑量效應(yīng)關(guān)系,雞胚肝組織SelWmRNA表達(dá)水平亦呈劑量效應(yīng)關(guān)系,而SecS、SPS-1mRNA表達(dá)水平呈波動(dòng)性變化。
　　 3.通過對(duì)雞肝臟組織細(xì)胞凋亡及凋亡基因Caspase-3、Cas