川芎嗪抗缺血再灌注損傷作用與JNK信號(hào)通路的相關(guān)性分析.pdf

1、分類(lèi)號(hào)R966學(xué)校代號(hào)10572UDC610密級(jí)學(xué)號(hào)091100448廣州中醫(yī)藥大學(xué)GuangzhouGuangzhouGuangzhouGuangzhouUniversityUniversityUniversityUniversityofofofofChineseChineseChineseChineseMedicineMedicineMedicineMedicine碩士學(xué)位論文川芎嗪抗缺血再灌注損傷作用與川芎嗪抗缺血再灌注損傷作用與

2、JNKJNK信號(hào)通路的相關(guān)性分析信號(hào)通路的相關(guān)性分析學(xué)位申請(qǐng)人王昀指導(dǎo)教師姓名馬武華馬武華專(zhuān)業(yè)名稱(chēng)麻醉學(xué)麻醉學(xué)申請(qǐng)學(xué)位類(lèi)型專(zhuān)業(yè)學(xué)位專(zhuān)業(yè)學(xué)位論文提交日期20122012年5月I摘要研究腦缺血再灌注損傷的機(jī)制及防治措施，一直是生命科學(xué)研究的重點(diǎn)和熱點(diǎn)，具有重要的醫(yī)學(xué)價(jià)值。而大量研究表明，腦缺血損傷與絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)級(jí)聯(lián)途徑密切相關(guān)。而CJun氨基端激酶(JNK)為MAPK家族中的重要成員，已證實(shí)JNK傳導(dǎo)通路是導(dǎo)致細(xì)胞凋亡的重

3、要信號(hào)通路。它在細(xì)胞分化、凋亡、應(yīng)激反應(yīng)以及多種人類(lèi)疾病的發(fā)生與發(fā)展中起著重要的作用。臨床中川芎嗪常用于缺血性腦血管疾病及其后遺癥的治療，然而，我們對(duì)其作用機(jī)制尚有不少爭(zhēng)議。本研究擬在體外原代培養(yǎng)大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞的基礎(chǔ)上，探討川芎嗪對(duì)缺氧復(fù)氧大鼠海馬神經(jīng)元JNK信號(hào)通路的影響，試圖通過(guò)本研究，從細(xì)胞、分子水平上闡明JNK信號(hào)通路在神經(jīng)細(xì)胞凋亡中的作用，以及川芎嗪腦保護(hù)作用機(jī)制，為臨床上防治缺血缺氧性疾病提供有效手段和理論依據(jù)。目的：1

4、觀察JNK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在缺血再灌注誘導(dǎo)體外培養(yǎng)的神經(jīng)細(xì)胞損傷中作用并探討其作用機(jī)制。2觀察川芎嗪對(duì)缺氧復(fù)氧大鼠海馬神經(jīng)元JNK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的干預(yù)，并探討其作用機(jī)理。方法：1.體外培養(yǎng)大鼠海馬神經(jīng)元，培養(yǎng)第79天，用光學(xué)顯微鏡觀察其形態(tài)。2.實(shí)驗(yàn)分組及缺氧復(fù)氧模型的建立以培養(yǎng)79天的胎鼠海馬神經(jīng)元為研究對(duì)象，隨機(jī)分為6組：L組(TMP低濃度組60ugml)，M組（TMP中濃度組200ugml），H組（TMP高濃度組800ugml），C組（

5、對(duì)照組0ugml），J組(JNK抑制劑組10molL)，N組（正常組）。除正常組外分別加入相應(yīng)濃度的川芎嗪或JNK抑制劑，作用1小時(shí)后放入90%N210%CO2培養(yǎng)箱中作用2小時(shí)誘導(dǎo)缺氧，然后放入5%CO2培養(yǎng)箱中復(fù)氧。3.培養(yǎng)79天的胎鼠海馬神經(jīng)元缺氧復(fù)氧損傷后，MTT法檢測(cè)細(xì)胞活力，硝酸還原酶法檢測(cè)培養(yǎng)基上清液中NO的含量，免疫印跡法(WesternBlot)檢測(cè)蛋白JIP1、Bad、Caspases1的表達(dá)。成果：1缺氧復(fù)氧損傷后