高果糖飲食對大鼠肝臟ChREBP、SREBP-1c表達(dá)的影響及其意義.pdf

1、目的：觀察高果糖飲食喂養(yǎng)大鼠肝臟碳水化合物反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(carbohydrate responsive element binding-protein，ChREBP)、固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白－1c(sterol regulatory element binding protein-1c，SREBP－1c)及其靶基因的mRNA和蛋白的表達(dá)，探討高果糖飲食對大鼠肝臟脂質(zhì)合成的影響。
　　方法：48只雄性健康Wistar大鼠(由河北醫(yī)

2、科大學(xué)實驗動物中心提供)隨機(jī)分為兩組：正常對照組(NC)24只、高果糖飲食組(HF)24只。正常對照組給予基礎(chǔ)飼料，熱量組成：碳水化合物65.5％；蛋白24.2％；脂肪10.3％；高果糖組給予高果糖飲食，熱量組成：碳水化合物77％(果糖34.5％)蛋白16％；脂肪7％。分別于喂養(yǎng)8周、16周末分批處死各組大鼠，留取血及肝臟組織標(biāo)本。每組大鼠處死前禁食12小時過夜，行口服葡萄糖耐量實驗(OGTT)、清醒狀態(tài)下高胰島素－正葡萄糖鉗夾試驗，計

3、算葡萄糖曲線下面積(AUCglu)、葡萄糖輸注率(GIR)；測量大鼠體重及肝臟濕重，計算肝指數(shù)(肝重與體重的比值)；頸動脈取血，分離血清，測定血清甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、游離脂肪酸(FFA)、空腹血糖(FBG)、空腹胰島素(FINS)；肝組織病理學(xué)檢查判斷肝脂質(zhì)沉積程度；并測定肝組織中甘油三酯含量，檢測肝臟固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白－1c(SREBP－1c)、碳水化合物反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(

4、ChREBP)及脂質(zhì)合成酶類脂肪酸合酶(FAS)、乙酰輔酶A羧化酶(ACC)的mRNA及蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果：(1)大鼠體重、肝指數(shù)、生化：
　?、?周、16周兩組大鼠體重?zé)o顯著差異(P>0.05)，HF組大鼠肝指數(shù)較NC組明顯升高(P<0.01)；
　?、?周、16周HF組大鼠血清ALT、AST、TG及TC水平較NC組顯著升高(P<0.01)；
　　(2)口服葡萄糖耐量試驗(OGTT)：8周、16周HF組大鼠

5、葡萄糖曲線下面積(AUCglu)較NC組顯著增加(P<0.01)；
　　(3)空腹血糖(FBG)、空腹血清胰島素(FINS)及葡萄糖輸注率(GIR)：8周、16周HF組大鼠FBG、FINS較NC組明顯升高(P<0.01)，GIR較NC組明顯降低(P<0.01)；
　　(4)游離脂肪酸(FFA)：8周、16周HF組大鼠血清FFA水平較NC組顯著增加(P<0.01)；
　　(5)肝臟甘油三酯(TG)水平：8周、16周HF組

6、大鼠肝臟TG較NC組顯著增加(P<0.01)；
　　(6)肝組織病理學(xué)檢查：8周HF組大鼠肝細(xì)胞出現(xiàn)明顯的脂肪變性及脂質(zhì)沉積，16周HF組大鼠肝細(xì)胞脂肪變性及脂質(zhì)沉積更為明顯；
　　(7)ChREBP、SREBP-1c、FAS、ACC mRNA表達(dá)及蛋白水平：8周、16周HF組大鼠ChREBP、SREBP-1c、FAS、ACC mRNA表達(dá)及蛋白水平均較NC組顯著增高(P<0.01)，且16周較8周進(jìn)一步增高(P<0.01)