樺褐孔菌多糖對他克林肝毒性的保護(hù)作用及其機制研究.pdf

1、臨床用藥中肝毒性約占藥物毒副反應(yīng)總數(shù)的10％～15％，隨著新的化學(xué)藥物不斷問世，肝毒性藥物逐漸增多，藥物性肝病的發(fā)病率逐漸增高。藥物肝毒性制約了許多藥物的臨床應(yīng)用，是新藥不能進(jìn)入臨床和退出藥物市場的主要原因。他克林(Tacrine)是美國食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)上市的第-個用于治療輕、中度老年癡呆的藥物，但是臨床發(fā)現(xiàn)，他克林有明顯的肝毒性，服藥數(shù)周后50％的病人血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)升高，25％可達(dá)到正常的3倍多，有2％的敏感病人的血清

2、ALT甚至超過正常水平的20倍，還有少數(shù)引起黃疸的病例報道。
　　 而臨床上在預(yù)防和治療藥物肝損傷時存在明顯的盲區(qū)，表現(xiàn)在不能提前預(yù)測患者發(fā)生藥物肝臟損害的可能性，沒有確切可行的抗肝臟損害的藥物，損害機理不明確等方面。因此從天然食物中尋找對抗藥物肝毒性作用的功能性組分，通過膳食攝入的方式供給人體，是解決問題的最佳途徑。
　　 樺褐孔菌，又名白樺茸，屬真菌門，擔(dān)子菌亞門，菌綱非褐菌目，多孔菌科，褐臥孔菌屬，生于白樺、銀樺、

3、榆樹、赤楊等活立木的樹皮下或砍伐后樹木的枯干上。樺褐孔菌分布于北半球40～50°地區(qū)，在我國的黑龍江、吉林兩省資源較豐富。樺褐孔菌常被用作顏色深的食用色素原料，又被用作飲料、調(diào)味品、餅干等的輔助品，民間廣泛用于防治消化道、心血管和腫瘤等各種疾病。研究表明，樺褐孔菌多糖具有抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、抗病毒等作用。但對其藥物肝毒性保護(hù)作用的報道甚少，其作用機制也不清楚。
　　 目的:
　　 以他克林處理的人肝癌HepG2細(xì)胞

4、為模型，探討樺褐孔菌多糖對藥物肝毒性的保護(hù)作用及其可能機制。
　　 方法:
　　 本研究我們以他克林處理的人肝癌HepG2細(xì)胞為模型，樺褐孔菌多糖預(yù)處理HepG2細(xì)胞，以2'，7'-二氫二氯熒光素法測定細(xì)胞內(nèi)ROS的水平，羅丹明測定細(xì)胞線粒體膜電位，細(xì)胞免疫組織化學(xué)法觀察線粒體DNA的8-OHdG水平，AnnexinV-FITC和PI雙染色流式細(xì)胞儀觀察細(xì)胞凋亡，免疫熒光試劑盒對細(xì)胞色素C釋放，Caspase-3活性進(jìn)行

5、測定。實驗結(jié)果用SPSS17.0統(tǒng)計軟件包進(jìn)行統(tǒng)計分析。
　　 結(jié)果:
　　 他克林可致HepG2細(xì)胞ROS水平上升、線粒體DNA的8-OHdG水平升高、線粒體膜電位下降、細(xì)胞色素C釋放、Caspase-3活性增強、凋亡細(xì)胞數(shù)增加，并呈明顯劑量依賴關(guān)系，差異均有統(tǒng)計學(xué)意(P＜0.05);樺褐孔菌多糖預(yù)處理HepG2細(xì)胞1h后，可明顯抑制他克林誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞ROS水平上升、線粒體DNA的8-OHdG水平升高、線粒體膜