麝香通心滴丸對(duì)心梗小鼠外周微循環(huán)障礙的作用和機(jī)制研究.pdf

1、在急性心肌梗死患者中，其冠脈微血管系統(tǒng)常由于缺血再灌而發(fā)生不可逆損傷，最終導(dǎo)致缺血心肌血流供應(yīng)再度減少，加重?fù)p害。相對(duì)于大血管，微循環(huán)約占機(jī)體脈管系統(tǒng)的20％，其在心肌組織中與心肌細(xì)胞的比例接近1∶1，但其作用尤其在冠脈血管疾病中的作用長(zhǎng)久以來一直被人們所忽視。隨著研究的深入，臨床醫(yī)生越來越認(rèn)識(shí)到冠脈微循環(huán)障礙的重要性。由于相關(guān)的機(jī)制不清，當(dāng)前尚缺乏有效手段來直接干預(yù)冠脈微循環(huán)障礙。因此，探究冠脈微循環(huán)障礙的發(fā)病機(jī)制及探尋行之有效的治療

2、舉措便顯得尤為重要。麝香通心滴丸已在臨床上被證實(shí)具有明確的改善冠脈慢血流患者癥狀的作用，但是其是否通過直接作用于微循環(huán)，以及具體的作用的機(jī)制尚不清楚。本課題將探究麝香通心滴丸對(duì)模型小鼠的外周微循環(huán)障礙的改善作用及其可能作用的機(jī)制？
　　目的:
　　明確麝香通心滴丸溶液對(duì)急性心肌梗死聯(lián)合腹腔脂多糖注射誘導(dǎo)的小鼠外周微循環(huán)障礙的改善作用并探討其相關(guān)機(jī)制。
　　方法:
　　1、誘導(dǎo)小鼠外周微循環(huán)障礙模型:選用6周至8周

3、C57雄性小鼠(20±2g)50只，隨機(jī)分為假手術(shù)對(duì)照組（Control組）、微循環(huán)障礙模型組（急性心梗聯(lián)合脂多糖誘導(dǎo)（MI+LPS）組）、模型聯(lián)合麝香通心滴丸干預(yù)(SXTXDW)組、模型聯(lián)合麝香通心滴丸及炔丙基甘氨酸干預(yù)(SXTXDW+PAG)組、模型聯(lián)合硫氫化鈉干預(yù)(NaHS)組。假手術(shù)對(duì)照組小鼠在異氟烷麻醉下行開胸但冠狀動(dòng)脈不結(jié)扎處理，而后四組小鼠在氣麻下行冠脈前降支結(jié)扎手術(shù)，以標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ?qū)碾妶DST段抬高作為判定標(biāo)準(zhǔn)。心梗手術(shù)1周后

4、予以假手術(shù)對(duì)照組小鼠腹腔注射200ul生理鹽水，而MI+LPS組、SXTXDW組、SXTXDW+PAG組和NaHS組小鼠腹腔注射脂多糖溶液(2mg/kg)。采用Evan Blue合并TTC染色、小動(dòng)物心電圖評(píng)估小鼠心肌梗死情況，小動(dòng)物超聲評(píng)估小鼠心功能。
　　2、麝香通心滴丸改善模型小鼠外周微循環(huán)的作用:腹腔注射LPS24小時(shí)后給予不同組的小鼠相對(duì)應(yīng)的干預(yù)措施。采集圖像并分析提睪肌微循環(huán)血流速度和白細(xì)胞粘附數(shù)。運(yùn)用激光多普勒測(cè)定小

5、鼠腸管血流灌注情況。通過流式細(xì)胞儀檢測(cè)小鼠白細(xì)胞表面CD11b和CD62L表達(dá)改變。實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)，處死小鼠，留取提睪肌、心肌、白細(xì)胞和主動(dòng)脈標(biāo)本，檢測(cè)以上標(biāo)本CSE相對(duì)表達(dá)量。
　　3、麝香通心滴丸改善模型小鼠外周微循環(huán)的可能分子機(jī)制:通過DAPI染色評(píng)估不同干預(yù)組小鼠白細(xì)胞體外粘附水平，并對(duì)可能參與調(diào)解的FOXO1相對(duì)表達(dá)量及其線粒體DNA相對(duì)拷貝數(shù)進(jìn)行分析。
　　結(jié)果:
　　1、與Control組相比，MI+LPS組小

6、鼠心功能、提睪肌微血管血流速度和腸管血流灌注量明顯降低(p＜0.05)。提示:急性心梗手術(shù)合并腹腔注射脂多糖可誘導(dǎo)小鼠外周微循環(huán)障礙。
　　2、與Control組相比，MI+LPS組小鼠及SXTXDW+PAG組小鼠微循環(huán)血流速度和腸管血流灌注顯著降低，同時(shí)伴有微循環(huán)中白細(xì)胞粘附數(shù)目增加，白細(xì)胞表面CD11b表達(dá)異常增高，CD62L表達(dá)下調(diào)。無論是SXTXDW還是NaHS都可顯著提高小鼠提睪肌微循環(huán)血流速度和腸管血流灌注，降低白細(xì)胞

7、粘附，以及白細(xì)胞表面CD11b的表達(dá)，上調(diào)CD62L的表達(dá)(p＜0.05)。與Control組相比，MI+LPS組小鼠提睪肌、心肌和白細(xì)胞CSE表達(dá)減弱，而SXTXDW干預(yù)則可上調(diào)提睪肌、心肌和白細(xì)胞CSE的表達(dá)(p＜0.05)。提示:麝香通心滴丸可顯著改善小鼠外周微循環(huán)障礙，其機(jī)制可能涉及硫化氫相關(guān)通路。
　　3、與Control組相比，MI+LPS組小鼠白細(xì)胞體外粘附數(shù)目增多，白細(xì)胞FOXO1表達(dá)增強(qiáng)，白細(xì)胞線粒體DNA相對(duì)拷