通心絡(luò)對(duì)實(shí)驗(yàn)性腦缺血保護(hù)作用的理論探討和機(jī)制研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文通心絡(luò)對(duì)實(shí)驗(yàn)性腦缺血保護(hù)作用的理論探討和機(jī)制研究姓名：吳正國(guó)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：中西醫(yī)結(jié)合臨床指導(dǎo)教師：吳以嶺20060401中文摘要48h、72h分批處死部分動(dòng)物(n=8)。各組大鼠用電鏡觀察腦缺血后皮層微血管超微結(jié)構(gòu)，應(yīng)用Evansblue法測(cè)定血腦屏障通透性，用干濕重法測(cè)定腦含水量，按照試劑盒說明書進(jìn)行測(cè)定血漿ET和N0含量，免疫組化法測(cè)定缺血側(cè)皮層Ⅷ因子和微血管周圍IL一6和IL—l8的表達(dá)，通過流式

2、細(xì)胞儀測(cè)定缺血側(cè)皮層ICAM一1、IL一6和IL一1B的表達(dá)。2通心絡(luò)對(duì)實(shí)驗(yàn)性腦缺血大鼠行為學(xué)和組織形態(tài)學(xué)的影響：實(shí)驗(yàn)分組和造模同前，通過姿勢(shì)反射試驗(yàn)、肢體不對(duì)稱應(yīng)用試驗(yàn)和角落試驗(yàn)進(jìn)行行為學(xué)評(píng)分，TTC染色測(cè)定梗死面積和電鏡觀察神經(jīng)元的超微結(jié)構(gòu)改變。3通心絡(luò)對(duì)實(shí)驗(yàn)性腦缺血后自由基的影響：實(shí)驗(yàn)分組和造模同前，在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)頸動(dòng)脈采血和斷頭取腦，按試劑盒步驟測(cè)定大鼠缺血后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)血清和皮層的超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、谷

3、胱甘肽過氧化物酶(GSHPx)活性和丙二醛(MDA)含量的變化。4通心絡(luò)對(duì)實(shí)驗(yàn)性腦缺血皮層氨基酸含量的影響：實(shí)驗(yàn)分組和造模同前，在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)斷頭取腦，冰盤中分離缺血側(cè)皮層，用l％磺基水楊酸鈉溶液500ul勻漿，4℃15000r／min離心10分鐘，取上清。采用高效液相色譜儀(mpC)檢測(cè)天門冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、Y一氨基丁酸(GABA)含量。5通心絡(luò)對(duì)實(shí)驗(yàn)性腦缺血皮層神經(jīng)元[Can]i的影響：實(shí)驗(yàn)分組和造

4、模同前，在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)斷頭取腦，在冰盤中取視交叉后半影區(qū)皮層，進(jìn)行單個(gè)神經(jīng)元皮層細(xì)胞的分離，應(yīng)用激光共聚焦觀察神經(jīng)元[Ca2]i的變化。6通心絡(luò)對(duì)實(shí)驗(yàn)性腦缺血誘導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞調(diào)亡的影響：實(shí)驗(yàn)分組和造模同前，應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)缺血側(cè)皮層神經(jīng)細(xì)胞凋亡率，免疫組織化學(xué)法檢測(cè)缺血側(cè)皮層Caspase一3、P53和HSP70的表達(dá)，Wbstemblot和RTPCR方法分析缺血側(cè)皮層Caspase一3、P53和HSP70蛋白和mRNA的表達(dá)。仕甲多日木